| 亨廷顿蛋白相关蛋白1基因对小鼠成纤维细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 曹媛媛,杨桂枝,龚艳菊,赵佳,冯颖,郑翔,周雪.亨廷顿蛋白相关蛋白1基因对小鼠成纤维细胞增殖的影响[J].四川大学学报(医学版),2019,50(3):298-304. |
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| 作者姓名： | 曹媛媛 杨桂枝 龚艳菊 赵佳 冯颖 郑翔 周雪 |
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| 作者单位： | 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 成都610041 |
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| 基金项目： | 成都科技局惠民项目（No. 2016-HM01-00514-SF）资助 |
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| 摘 要： | 目的 研究亨廷顿蛋白相关蛋白1（Huntingtin-associated protein 1，Hap1）基因对成纤维细胞增殖的影响。 方法 体外分离培养获得Hap1基因敲除（Hap1-/-）的原代成纤维细胞，鉴定后采用EdU增殖实验、细胞周期（流式细胞术）检测验证Hap1成纤维细胞增殖的改变；将野生型和Hap1-/-成纤维细胞送转录组测序筛选增殖相关基因，实时荧光定量PCR（qPCR）验证相关基因表达水平的改变。对小鼠进行皮肤损伤造模检测Hap1敲减（Hap1+/-）小鼠皮肤损伤修复情况；PCNA免疫组化染色检测损伤修复过程中成纤维细胞的增殖水平。 结果 成功培养原代Hap1-/-成纤维细胞；与野生型成纤维细胞相比，Hap1-/-成纤维细胞EdU阳性比例减少，进入S期的细胞比例减少；原代成纤维细胞转录组测序筛选出Cdc25C、E2f7、E2f8和Ccl5四个差异表达的增殖相关基因，qPCR验证发现E2f7在Hap1敲除后表达增多。小鼠皮肤损伤结果显示，Hap1+/-小鼠伤口面积较相同时间点野生型小鼠伤口面积大且愈合速度减慢，成纤维细胞增殖阳性密度低于野生型小鼠。 结论 Hap1可能通过抑制细胞周期负性调节因子E2f7的表达对成纤维细胞增殖起正向调节作用，其缺失将抑制成纤维细胞进入S期，从而减少细胞增殖，影响伤口修复。
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| 关 键 词： | 亨廷顿蛋白相关蛋白1 成纤维细胞 增殖 损伤修复 |
| 收稿时间： | 2018-09-10 |
Effect of Huntingtin-associated Protein 1 Gene on Proliferation of Mouse Fibroblasts |
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| CAO Yuan-yuan,YANG Gui-zhi,GONG Yan-jü,ZHAO Jia,FENG Ying,ZHENG Xiang,ZHOU Xue.Effect of Huntingtin-associated Protein 1 Gene on Proliferation of Mouse Fibroblasts[J].Journal of West China University of Medical Sciences,2019,50(3):298-304. |
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| Authors: | CAO Yuan-yuan YANG Gui-zhi GONG Yan-jü ZHAO Jia FENG Ying ZHENG Xiang ZHOU Xue |
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| Institution: | Department of Histology, Embryology and Neurobiology, West China School of Basic Medical Science & Forensic Medicine, Sichuan University, Chengdu 610041, China |
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