苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2 心肌细胞肥大的作用研究

目的探究苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2 心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法（1）体外 培养大鼠H9c2 心肌细胞，采用MTT 法评价不同浓度的异丙肾上腺素（0.625、1.25、2.5、5、10 μmol·L-1）和不 同浓度的苦瓜皂苷L（1.625、3.125、6.25、12.5、25.0 μg·mL-1）对心肌细胞活力的影响。（2） 采用异丙肾上腺素 诱导心肌细胞肥大模型。实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L 干预组和苦瓜皂苷L 单独组。分别通过细胞 拍照结合ImageJ 软件测量、荧光定量PCR 法考察苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表 面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC 及α-SKA 表达的影响。在此基础上，选择参与甘油磷脂代谢的 酶VI 组磷脂酶A2（PLA2G6）、二酰甘油激酶ζ（DGKZ）、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1（GPCPD1）为指标，评价苦 瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3 种酶基因表达的影响；进一步以PLA2G6 和DGKZ 蛋白为指 标，采用Western Blot 法考察苦瓜皂苷L 对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达的影 响。结果（1）与正常组比较，异丙肾上腺素（0.625~10 μmol·L-1）和苦瓜皂苷L（1.625~25 μg·mL-1）对心肌细胞 活力没有明显影响（P＞0.05）。本研究选用异丙肾上腺素10 μmol·L-1 和苦瓜皂苷L 12.5 μg·mL-1 进行实验。 （2）与正常组比较，模型组心肌细胞表面积增加（P＜0.05），心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA 表 达上调（P＜0.05），PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达上调（P＜0.05），PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达增加 （P＜0.05）；与模型组比较，苦瓜皂苷L 干预组能够降低心肌细胞表面积（P＜0.05），下调心肌肥大相关胚胎基 因ANP、β-MHC、α-SKA 表达（P＜0.05）， 下调PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA 表达（P＜0.05）， 降低 PLA2G6 和DGKZ 蛋白表达（P＜0.05）。结论苦瓜皂苷L 可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大，可能与 其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6 和DGKZ 的表达有关。