人ⅡA型磷脂酶A2衍生多肽M17杀菌作用的研究

目的: 研究和比较人ⅡA型磷脂酶A₂(phospholipase A₂,PLA₂)衍生多肽M17,P26和N_1-11对不同细菌在体外的杀菌效应。方法: 根据人ⅡA型PLA₂氨基酸顺序分别设计合成3个肽分子M17(p_51-67),P26(p_99-124),N_1-11(p_1-11)。采用琼脂铺板计数法测定杀菌活性,将不同浓度衍生肽分别与革兰阳性菌(G⁺)金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、屎肠球菌和革兰阴性菌(G^-)大肠杆菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌在37℃孵育2.5 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18~24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果: ⅡA型PLA₂M17对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌的杀菌回归方程分别为:Y=1.464X+3.795(ED₅₀ 6.65 mg·L^-1),Y=1.152X+3.419(ED₅₀ 23.57 mg·L^-1),Y 0.836X+3.832 (ED₅₀ 24.95 mg·L^-1);对大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、绿脓杆菌的杀菌回归方程分别为:Y=0.877X+4.054(ED₅₀ 12.00 mg·L^-1),Y=1.094X+3.371(ED₅₀ 30.83 mg·L^-1),Y=1.027X+3.626(ED₅₀ 21.77 mg·L^-1);M17肽分子对G⁺菌与G^-菌均有较强的杀菌活性。P26和N_1-11对金黄色葡萄球菌的杀菌回归曲方程分别为:Y=0.915X+2.766(ED₅₀ 276.39 mg·L^-1),Y=1.389X+1.668(ED₅₀ 250.52 mg·L^-1), P26和 N_1-11对大肠杆菌的杀菌回归方程为:Y=1.327X+1.437(ED₅₀ 484.18 mg·L^-1), Y=0.881X+2.903(ED₅₀ 240.02 mg·L^-1);N_1-11和P26对G⁺菌有较强的杀菌活性,但对G^-菌杀菌活性较弱。M17肽分子对金黄色葡萄球菌的杀菌活性强于P26及N_1-11,M17肽分子对大肠杆菌的杀菌活性明显强于P26及N_1-11。结论: 衍生自人ⅡA型PLA₂保守区域17个氨基酸残基的肽M17对G⁺菌和G^-菌均有较强的杀菌活性,这可能与M17肽分子更易于与细菌结合并发挥作用有关。