| 麻花秦艽ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 朱田田,晋玲,张裴斯,林丽,张弦飞.麻花秦艽ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(6):74-78. |
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| 作者姓名： | 朱田田 晋玲 张裴斯 林丽 张弦飞 |
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| 作者单位： | 甘肃中医学院 中(藏)药资源研究所, 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室, 药用植物遗传育种研究所, 兰州 730000,甘肃中医学院 中(藏)药资源研究所, 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室, 药用植物遗传育种研究所, 兰州 730000,甘肃中医学院 中(藏)药资源研究所, 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室, 药用植物遗传育种研究所, 兰州 730000,甘肃中医学院 中(藏)药资源研究所, 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室, 药用植物遗传育种研究所, 兰州 730000,甘肃中医学院 中(藏)药资源研究所, 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室, 药用植物遗传育种研究所, 兰州 730000 |
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| 基金项目： | 中央本级重大增减支项目(20603020212,20603020110);甘肃省中医药科学技术研究课题重点项目(GZK-2010-Z2) |
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| 摘 要： | 目的:建立麻花秦艽的简单重复序列区间-聚合酶链反应(ISSR-PCR)最佳反应体系,为该药材的种质鉴定及遗传多样性等研究提供参考。方法:运用单因素试验和正交试验优选麻花秦艽的ISSR-PCR反应体系中DNA模板用量,Mg2+浓度,dNTPs浓度,TaqDNA聚合酶用量和引物浓度等参数,确定麻花秦艽每条引物的最佳退火温度。结果:ISSR-PCR最佳反应体系(20μL)为模板DNA1μL(36mg·L-1),10×PCR缓冲液(含Mg2+)1.75μL(20mmol·L-1),dNTPs0.8μL(10mmol·L-1),Taq酶0.1μL(0.5%)及引物0.6μL(10mmol·L-1);筛选出12条多态性高、扩增稳定的ISSR引物,UBC-809引物的最佳退火温度55.5℃。扩增出的7条带中多态性带为6条,多态性位点比率85.71%。结论:建立的麻花秦艽ISSR-PCR反应体系稳定可靠,位于500bp处的条带为非多态性条带,可作为该种属的特征性条带。
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| 关 键 词： | 麻花秦艽 ISSR反应体系 退火温度 UBC-809引物 |
| 收稿时间： | 7/4/2014 12:00:00 AM |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Gentiana straminea |
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| ZHU Tian-tian,JIN Ling,ZHANG Pei-si,LIN Li and ZHANG Xian-fei.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Gentiana straminea[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2015,21(6):74-78. |
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| Authors: | ZHU Tian-tian JIN Ling ZHANG Pei-si LIN Li and ZHANG Xian-fei |
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| Institution: | Institute of Chinese(Tibetan) Medicinal Resources, Key Laboratory of Chemistry and Quality for Chinese(Tibetan) Medicine of Colleges and Universities in Gansu Province, Institute of Genetic Breeding of Medicinal Plant, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China,Institute of Chinese(Tibetan) Medicinal Resources, Key Laboratory of Chemistry and Quality for Chinese(Tibetan) Medicine of Colleges and Universities in Gansu Province, Institute of Genetic Breeding of Medicinal Plant, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China,Institute of Chinese(Tibetan) Medicinal Resources, Key Laboratory of Chemistry and Quality for Chinese(Tibetan) Medicine of Colleges and Universities in Gansu Province, Institute of Genetic Breeding of Medicinal Plant, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China,Institute of Chinese(Tibetan) Medicinal Resources, Key Laboratory of Chemistry and Quality for Chinese(Tibetan) Medicine of Colleges and Universities in Gansu Province, Institute of Genetic Breeding of Medicinal Plant, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China and Institute of Chinese(Tibetan) Medicinal Resources, Key Laboratory of Chemistry and Quality for Chinese(Tibetan) Medicine of Colleges and Universities in Gansu Province, Institute of Genetic Breeding of Medicinal Plant, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gentiana straminea inter-simple sequence repeat reaction system annealing temperature UBC-809 primer |
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