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五子衍宗方通过调节miR-let-7-Imp轴对老龄大鼠精原干细胞增殖的影响
引用本文:陈茜,赵海霞,马娜,刘珍财,袁丁,张长城.五子衍宗方通过调节miR-let-7-Imp轴对老龄大鼠精原干细胞增殖的影响[J].中国实验方剂学杂志,2019,25(3):45-52.
作者姓名:陈茜  赵海霞  马娜  刘珍财  袁丁  张长城
作者单位:三峡大学 医学院, 湖北 宜昌 443002,三峡大学 医学院, 湖北 宜昌 443002,三峡大学 医学院, 湖北 宜昌 443002,三峡大学 医学院, 湖北 宜昌 443002,三峡大学 仁和医院, 湖北 宜昌 443001,三峡大学 医学院, 湖北 宜昌 443002
基金项目:国家自然科学基金项目(81573931,81503334,81774316,81373881)
摘    要:目的:通过miR-let-7-Imp轴探讨五子衍宗方(WZ)对老龄大鼠精原干细胞增殖的作用及其机制。方法:将40只18月龄SPF级SD雄性大鼠随机分为老龄模型组,WZ低、中、高剂量组,每组10只,另以10只2月龄大鼠作为青年组。WZ低、中、高剂量组分别灌胃给药0. 4,0. 8,1. 6 g·kg~(-1),青年组、老龄模型组分别灌胃给予生理盐水,每周停药2 d,持续给药4个月。末次给药后麻醉处死大鼠,快速取出睾丸组织。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测miR-let-7,Imp mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫荧光检测睾丸精原干细胞增殖相关信号通路磷酸化(p)-两面神激酶2(JAK2)/JAK2,p-信号传导及转录激活因子3(STAT3)/STAT3蛋白的表达与定位,免疫荧光检测精原干细胞数量及增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织形态学变化。结果:Real-time PCR结果显示,与青年组比较,老龄模型组miR-let-7 mRNA表达水平显著升高(P 0. 01),Imp mRNA表达水平显著降低(P 0. 01),而给予WZ干预后,miR-let-7 mRNA水平明显降低(P 0. 05,P 0. 01),Imp mRNA表达水平明显升高(P 0. 05); Western blot和免疫荧光结果显示,精原干细胞增殖相关信号通路蛋白p-JAK2,p-STAT3表达降低(P 0. 01),WZ处理后,p-JAK2,p-STAT3表达明显增多(P 0. 05,P 0. 01);免疫荧光结果显示,与青年组比较,老龄模型组中精原干细胞数量减少,PCNA表达下降,WZ处理后,精原干细胞数量增多,PCNA表达上调; HE结果也显示,WZ能够明显改善自然衰老所致的睾丸组织形态结构变化。结论:WZ能够促进老龄大鼠精原干细胞的增殖,其作用机制可能与调节睾丸内miR-let-7-Imp轴有关。

关 键 词:五子衍宗方  精原干细胞  衰老  miR-let-7-Imp
收稿时间:2018/7/6 0:00:00

Effect of Wuzi Yanzong Fang in Promoting Spermatogonial Stem Cells Proliferation in Aging Rats by Regulating miR-let-7-Imp Axis
CHEN Qian,ZHAO Hai-xi,MA N,LIU Zhen-cai,YUAN Ding and ZHANG Chang-cheng.Effect of Wuzi Yanzong Fang in Promoting Spermatogonial Stem Cells Proliferation in Aging Rats by Regulating miR-let-7-Imp Axis[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2019,25(3):45-52.
Authors:CHEN Qian  ZHAO Hai-xi  MA N  LIU Zhen-cai  YUAN Ding and ZHANG Chang-cheng
Institution:Medical College of China Three Gorges University, Yichang 443002, China,Medical College of China Three Gorges University, Yichang 443002, China,Medical College of China Three Gorges University, Yichang 443002, China,Medical College of China Three Gorges University, Yichang 443002, China,Renhe Hospital of China Three Gorges University, Yichang 443001, China and Medical College of China Three Gorges University, Yichang 443002, China
Abstract:
Keywords:Wuzi Yanzong Fang  spermatogonial stem cells  aging  miR-let-7-imp
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