金香丹抑制NLRP3/IL-1β/Caspase-1信号通路缓解大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 观察金香丹预处理对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠模型心肌组织NOD样受体热蛋白结构域3（NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）/白细胞介素-1β（IL-1β）信号通路的影响，探讨金香丹对MIRI的保护作用及其机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分成假手术组，模型组，金香丹高、低剂量组及地奥心血康组，每组10只。造模前7 d开始，金香丹组给予金香丹片高、低剂量（0.72，0.18 g·kg^-1）灌胃；假手术组和模型组每天给予等体积生理盐水灌胃；地奥心血康组给予地奥心血康（1.29 g·kg^-1）灌胃。末次灌胃12 h后，结扎左冠状动脉前降支30 min，再灌注60 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。心电图检测ST段升高评价模型；比色法检测心脏组织肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）水平，苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织损伤情况，DNA断裂的原位末端标记（TUNEL）法检测心肌细胞凋亡情况，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织NLRP3，Caspase-1和IL-1β蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测心肌组织中NLRP3，Caspase-1和IL-1β mRNA的表达。结果 与假手术组比较，模型组心电图ST段显著升高（P<0.01），心肌组织CK和LDH活性显著增加（P<0.01），心肌组织凋亡细胞显著增加（P<0.01），NLRP3，IL-1β，Caspase-1蛋白和mRNA表达显著升高（P<0.01）；与模型组比较，金香丹高、低剂量组及地奥心血康组心电图ST明显降低（P<0.05，P<0.01），心肌组织CK和LDH活性明显降低（P<0.05，P<0.01），心肌细胞凋亡明显改善（P<0.05，P<0.01），降低NLRP3，IL-1β，Caspase-1蛋白和mRNA表达水平（P<0.05，P<0.01）；与地奥心血康组比较，金香丹低剂量组心电图ST段明显升高（P<0.05），金香丹高剂量组明显降低（P<0.05），金香丹高、低剂量组和地奥心血康组心肌组织绿色荧光强度明显降低（P<0.05，P<0.01），金香丹高剂量NLRP3，IL-1β，Caspase-1蛋白和mRNA表达均明显降低（P<0.05）。结论 金香丹可以降低心肌缺血再灌注损伤，其可能机制为抑制炎症小体NLRP3，降低IL-1β表达，抑制心肌细胞凋亡，缓解心肌缺血再灌注损伤。