三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用 |
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引用本文: | 夏晓茹,邹贤斐,张挺,孙莉,朱小春.三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用[J].中国药学杂志,2009,44(11):836-841. |
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作者姓名: | 夏晓茹 邹贤斐 张挺 孙莉 朱小春 |
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作者单位: | 温州医学院附属第一医院 浙江温州 325000 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金资助项目(M303606);温州市科技局资助项目(Y2003A007) |
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摘 要: | 目的探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞增殖以及IFN-γ和IL-4转录和翻译水平的影响。方法免疫磁珠分别分选15只MRL/lpr狼疮小鼠和15只C57BL正常对照小鼠脾脏CD4+T细胞,进而将CD4+T细胞随机分为空白组(RPMI1640),对照组(PHA20mg·L-1+IL-21000u·mL-1),ATO组PHA20mg·L-1+IL-21000u·mL-1(48h)后+ATO1.0μmol·L-1],体外共培养至72h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组CD4+T细胞的增殖和抑制水平;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IFN-γ和IL-4水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述细胞因子基因的转录水平。结果①分选后获得的CD4+T细胞纯度为(94.12±1.08)%,细胞存活率为(95.82±3.41)%;②MRL/lpr小鼠对照组CD4+T细胞的增殖水平(A值)(0.343±0.019)较空白组(0.054±0.008)高(P<0.001);却低于C57BL小鼠对照组的水平(0.375±0.018)(P<0.05);③MRL/lpr和C57BL小鼠ATO组CD4+T细胞增殖水平(A值)分别为(0.324±0.013)和(0.362±0.013),均低于对照组(P<0.05,P<0.05);④MRL/lpr小鼠对照组IFN-γ的表达水平(562.287±60.345)ng·L-1]明显高于C57BL小鼠对照组(253.208±59.434)ng·L-1](P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γ的抑制程度大于C57BL小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠对照组的IL-4表达水平(41.332±8.039)ng·L-1]与ATO组(23.046±3.253)ng·L-1]和C57BL小鼠对照组(29.303±8.038)ng·L-1]比较,也具有明显的统计学差异(P<0.05和P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IL-4的抑制程度高于C57BL小鼠(P<0.05);⑤在转录水平上,与C57BL小鼠相比,ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γmRNA和IL-4mRNA的抑制程度更加明显(P<0.05和P<0.05);ATO对IFN-γ和IL-4表达水平的抑制和转录水平的抑制正相关,r=0.720(P<0.001)和r=0.557(P<0.01)。结论MRL/lpr小鼠存在CD4+T细胞的异常增殖,ATO能在不影响细胞存活率的浓度下抑制MRL/lpr小鼠CD4+T细胞的异常增殖活化,通过抑制其细胞因子IFN-γ和IL-4的mRNA分泌影响两者的表达,且对MRL/lpr小鼠抑制程度大于C57BL小鼠,表明ATO能抑制狼疮鼠的异常免疫功能,可进一步用于SLE的治疗。
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关 键 词: | 系统性红斑狼疮 三氧化二砷 CD4+T细胞 γ-干扰素 白介素-4 |
收稿时间: | 2008-08-05; |
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