健脾化痰汤含药血清对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞蛋白质表达的影响

目的:探究健脾化痰汤含药血清对IR脂肪细胞蛋白质表达谱的影响,阐述其治疗IR相关机理。方法:运用体外试验方法,先将3T3-L1小鼠脂肪前体细胞分化为脂肪细胞,再采用地塞米松法构建IR脂肪细胞模型,再次随机分为IR组(10%空白组血清+1640培养液培养IR脂肪细胞)和健脾化痰汤组(10%健脾化痰汤组血清+1640培养液培养IR脂肪细胞),分别培养48 h,测定培养上清葡萄糖消耗量,同时收集各组细胞,分别提取细胞总蛋白,利用2-DE分离总蛋白,用PDQuest8.0软件分析2-DE图谱,比较组间蛋白表达量,运用MALDI-TOF-MS鉴定差异蛋白点肽谱,通过生物信息学分析确定差异蛋白质及其功能。结果:2组凝胶中有12个显著差异表达蛋白质点,与IR组比较,健脾化痰汤中表达上调有9个,即二氢硫辛酰胺脱氢酶、异戊酰辅酶A脱氢酶、酰基辅酶A结合蛋白、三磷酸腺苷合成酶、酰基辅酶A酰基转移酶2、线粒体H+-ATP合成酶、硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶、过氧化氢酶、二硫键异构酶6;下调有3个,即硫氧还蛋白、钙网蛋白、α-1-酸性糖蛋白,主要涉及能量代谢和氧化应激等相关蛋白。结论:健脾化痰汤可能通过影响脂肪细胞能量代谢和氧化应激相关蛋白表达,调节其能量代谢和氧化应激功能而改善IR,治疗非酒精性脂肪肝。