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IgG-HepG2细胞评价复方苦参注射液及其生产过程可能产生致敏原的研究——利用生物技术进行过程监控致敏性的方法学探索
引用本文:袁梽漪,王玉刚,雷帆,卢希,赵爽,姜敬非,李慧玉,陈勃杭,王智民,邢东明,丁怡,杜力军.IgG-HepG2细胞评价复方苦参注射液及其生产过程可能产生致敏原的研究——利用生物技术进行过程监控致敏性的方法学探索[J].中国中药杂志,2011,36(14):1850-1854.
作者姓名:袁梽漪  王玉刚  雷帆  卢希  赵爽  姜敬非  李慧玉  陈勃杭  王智民  邢东明  丁怡  杜力军
作者单位:清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;中国中医科学院 中药研究所, 北京 100700;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084;清华大学 医学院 生命科学学院 教育部蛋白质重点实验室, 北京 100084
基金项目:国家自然科学基金项目(30801523,30973896,81073092);国家"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX09308-003,2009ZX09502-021,2009ZX09502)
摘    要:目的:利用IgG promoter-HepG2细胞对复方苦参注射液生产过程中可能产生致敏原的生产节点进行研究。方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达质粒,转染入HepG2细胞,与常见致敏性物质(葛根素,卵白蛋白,LPS和伤寒菌疫苗)、复方苦参注射剂中使用到的辅料(NaOH,醋酸,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯即吐温80和乙醇)和生产过程中关键节点样品(S1~S8)进行孵育,30 m in后拍照,图像分析软件统计细胞荧光强度变化。结果:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏性物质呈阳性反应。注射剂辅料中醋酸和吐温80有致敏性,生产过程8个样品中,2个样品有显著致敏性。结论:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏原反应敏感,特异性高,适用于中药注射剂中致敏原快速筛选,可实现对中药注射剂生产过程中致敏原的实时监控。

关 键 词:IgG  中药注射剂  苦参  过敏反应
收稿时间:4/7/2011 12:00:00 AM

Evaluation of allergen during processes of Fufang Kushen injection by IgG-promoter-HepG2 cell assay in vitro
YUAN Zhiyi,WANG Yugang,LEI Fan,LU Xi,ZHAO Shuang,JIANG Jingfei,LI Huiyu,CHEN Bohang,WANG Zhimin,XING Dongming,DING Yi and DU Lijun.Evaluation of allergen during processes of Fufang Kushen injection by IgG-promoter-HepG2 cell assay in vitro[J].China Journal of Chinese Materia Medica,2011,36(14):1850-1854.
Authors:YUAN Zhiyi  WANG Yugang  LEI Fan  LU Xi  ZHAO Shuang  JIANG Jingfei  LI Huiyu  CHEN Bohang  WANG Zhimin  XING Dongming  DING Yi and DU Lijun
Institution:Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Institute of Chinese Materia Medica, Chinese Academy of China Medical Sciences, Beijing 100700, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Protein Science Laboratory of Ministry of Education, Laboratory of Pharmaceutical Sciences, School of Life Sciences and School of Medicine, Tsinghua University, Beijing 100084, China
Abstract:
Keywords:IgG  injection of traditional Chinese medicine  Sophora flavescens  allergic reaction
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