银杏叶胶囊对高同型半胱氨酸血症血管内皮细胞凋亡干预的实验研究

目的通过银杏叶胶囊对高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteine,HHcy)血管内皮细胞凋亡干预的实验研究,探寻其作用的细胞分子水平靶点。方法选用Wistar雄性大鼠制备HHcy模型。将42只大鼠按随机数字表法分为对照组(10只)、模型组(11只)、银杏叶组(11只)和叶酸组(10只)。对照组给予1%羟甲基纤维素钠溶液灌胃,模型组给予3%蛋氨酸混悬液(1.5 g/kg)灌胃,叶酸组给予3%蛋氨酸混悬液(1.5 g/kg)加叶酸混悬液(0.06 g/kg)灌胃,银杏叶组给予3%蛋氨酸混悬液(1.5 g/kg)加银杏叶混悬液(0.02g/kg)灌胃。HE染色观察各组大鼠主动脉组织形态学变化;检测各组大鼠血浆高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平和胸主动脉对不同浓度硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)的内皮依赖性舒张功能;采用RT-PCR测定c-Fos、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,BAX)、细胞抑制剂-凋亡蛋白2(cellular inhibitor of apoptosis protein 2,c-IAP2)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)基因表达。结果病理结果显示:模型组主动脉内皮层增厚、内皮细胞水肿脱落,可见少量泡沫细胞,中膜平滑肌细胞肌瘤样增殖,银杏叶组、叶酸组病变较轻。与对照组比较,模型组Hcy水平升高(P0.05),模型组Ach 10~(-6)mol/L、Ach 10~(-4)mol/L和SNP 10~(-7)~10~(-3)mol/L不同浓度血管内皮舒张率均降低(P0.01,P0.05),Bax、c-Fos及iNOS基因表达均增加,c-IAP2基因表达降低(均P0.05)。与模型组比较,银杏叶组及叶酸组Hcy水平降低(P0.05);除银杏组SNP 10~(-6)mol/L浓度外,银杏叶组和叶酸组其他各浓度SNP血管内皮舒张率均增加,银杏叶组和叶酸组浓度为Ach 10~(-6)mol/L和Ach 10~(-4)mol/L时Ach血管内皮舒张率增加(均P0.05);银杏叶组和叶酸组Bax、c-Fos及iNOS基因表达均降低(P0.05),叶酸组c-IAP2基因表达增高(P0.05)。结论银杏叶胶囊可降低血浆Hcy水平,下调Bax、c-Fos及iNOS基因表达,从而减少血管内皮细胞凋亡,改善血管内皮功能,延缓动脉粥样硬化的进程。