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藏红花病毒病原的分子鉴定
引用本文:谢 礼,吕明芳,董峰丽,饶君凤,毛碧增,洪 健.藏红花病毒病原的分子鉴定[J].中草药,2013,44(8):1033-1036.
作者姓名:谢 礼  吕明芳  董峰丽  饶君凤  毛碧增  洪 健
作者单位:1. 浙江大学生物技术研究所,浙江杭州 310058;浙江省农业科学研究院病毒学与生物技术研究所,浙江杭州 310021
2. 浙江省农业科学研究院病毒学与生物技术研究所,浙江杭州,310021
3. 浙江大学生物技术研究所,浙江杭州,310058
4. 杭州职业技术学院,浙江杭州,310018
基金项目:浙江省杭州市农业科研攻关项目(项目编号:20110232B16)浙江省中药材农业新品种选育重大科技专项(项目编号:2012C12912-7)
摘    要:目的 研究栽培藏红花的病毒病原.方法 综合运用病毒粒子形态和细胞病理学电镜观察、DAS-ELISA检测、RT-PCR检测及序列测定等技术进行病原鉴定.结果 透射电镜负染色观察到病株汁液含有600~900 nm的线状病毒粒子;超薄切片观察到病株细胞质内有大量线状病毒粒子、Ⅱ型风轮状内含体和电子致密无定型体,符合菜豆黄花叶病毒Beamyellow mosaic virus (BYMV)的病理学特征.应用BYMV抗体进行病株DAS-ELISA检测结果为阳性,应用马铃薯Y病毒属特异性引物Sprimer和M4对病株进行RT-PCR检测结果为阳性,对阳性结果进行分子克隆及序列测定发现目标序列与BYMV有99%的同源性.结论 综合检测结果判明侵染浙江藏红花的病毒病原为BYMV.

关 键 词:藏红花  病原鉴定  菜豆黄花叶病毒  分子鉴定  分子克隆

Molecular identification of viral pathogens in Crocus sativus
XIE Li,LV Ming-fang,DONG Feng-li,RAO Jun-feng,MAO Bi-zeng,HONG Jian.Molecular identification of viral pathogens in Crocus sativus[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2013,44(8):1033-1036.
Authors:XIE Li  LV Ming-fang  DONG Feng-li  RAO Jun-feng  MAO Bi-zeng  HONG Jian
Institution:1.Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China 2.Institute of Virology and Biotechnology, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China 3.Hangzhou Vocational and Technical College, Hangzhou 310018, China
Abstract:
Keywords:Crocus sativus L    pathogen identification  Beam yellow mosaic virus  molecular identification  molecular cloning
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