| 三七细胞色素P450酶基因PnCyp450_3响应丛枝菌根真菌诱导的表达特性分析 |
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| 引用本文： | 曹冠华,张兴开,柏旭,毕悦,殷红伟,张芸,贺森.三七细胞色素P450酶基因PnCyp450_3响应丛枝菌根真菌诱导的表达特性分析[J].中草药,2022,53(21):6848-6856. |
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| 作者姓名： | 曹冠华 张兴开 柏旭 毕悦 殷红伟 张芸 贺森 |
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| 作者单位： | 云南中医药大学 中药学院暨云南省南药可持续利用重点实验室, 云南 昆明 650500;云南中医药大学 昆明市澜湄区域传统药物资源开发利用研发中心, 云南 昆明 650500;曲靖师范学院 生物资源与食品工程学院, 云南高原生物资源保护与利用研究中心, 云南 曲靖 655000 |
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| 基金项目： | 中央本级重大增减支项目“名贵中药资源可持续利用能力建设项目”（2060302-2101-24）；国家自然科学基金资助项目（82260743）；云南省科技厅应用基础计划面上项目（202201AT070219，202001AT070109，2019FB122）；云南省中医药应用基础研究联合专项（202001AZ070001-010，202101AZ070001-014）；云南省“万人计划”青年拔尖人才专项（YNWR-QNBJ-2020-279）；昆明市国际（对外）科技合作基地项目（GHJD-2021030） |
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| 摘 要： | 目的 基于三七根转录组数据库，克隆三七皂苷合成关键酶细胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）基因，对其进行生物信息学分析，明确其对丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）诱导的响应，为进一步研究其催化特性奠定基础。方法 基因PnCyp450_3开放阅读框（open reading frame，ORF）克隆及克隆载体构建依据相应试剂盒说明书，通过化学转化法及氨苄青霉素抗性标记筛选阳性克隆。利用各种在线工具或软件完成生物信息学分析及系统发育树构建；基因表达特性分析采用实时荧光定量（real-time fluorescence quantitative，qPCR）技术。结果 成功克隆了1个三七细胞色素P450超家族基因PnCyp450_3，其ORF全长1617 bp，编码538个氨基酸，预测蛋白相对分子质量为59 690，等电点（pI）为8.50，含有5个保守结构域。组织表达特性结果显示，在主根、须根部位，PnCyp450_3均可响应根内球囊霉（Glomus intraradices）的诱导而显著上调表达（P<0.05），其中主根相对表达量最高（1.85倍），须根次之（1.22倍）。结论 PnCyp450_3是一个编码538个氨基酸的CYP450超家族基因，在主根、须根中均可响应根内球囊霉的诱导而显著上调表达，为深入研究三七皂苷合成关键酶基因响应生物因子诱导的调控机制提供了数据支持，具有重要的参考价值。
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| 关 键 词： | 三七 细胞色素P450 丛枝菌根真菌 生物信息学 实时荧光定量 |
| 收稿时间： | 2022/3/6 0:00:00 |
Expression characteristics of Panax notoginseng cytochrome P450 gene PnCyp450_3 under induction of Arbuscular Mycorrhizal Fungi |
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| CAO Guan-hu,ZHANG Xing-kai,BAI Xu,BI Yue,YIN Hong-wei,ZHANG Yun,HE Sen.Expression characteristics of Panax notoginseng cytochrome P450 gene PnCyp450_3 under induction of Arbuscular Mycorrhizal Fungi[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2022,53(21):6848-6856. |
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| Authors: | CAO Guan-hu ZHANG Xing-kai BAI Xu BI Yue YIN Hong-wei ZHANG Yun HE Sen |
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| Institution: | School of Chinese Materia Medica and Yunnan Key Laboratory of Southern Medicine Utilization, Yunnan University of Chinese Medicine, Kunming 650500, China;Kunming Lancang-Mekong Regional R&D Cental for the Development Utilization of Traditional Medicine Resources, Yunnan University of Chinese Medicine, Kunming 650500, China;Center for Yunnan Plateau Biological Resources Protection and Utilization, College of Biological Resource and Food Engineering, Qujing Normal University, Qujing 655000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Panax notoginseng (Burk) F H Chen cytochrome P450 arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) bioinformatics real-time fluorescent quantitative (qPCR) |
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