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青羊参遗传转化中组织培养系统的研究
引用本文:邱璐,王波,范树国,罗春梅,李艳华,陈凯,周银燕,杨启国,杨福锁.青羊参遗传转化中组织培养系统的研究[J].中草药,2007,38(11):1707-1712.
作者姓名:邱璐  王波  范树国  罗春梅  李艳华  陈凯  周银燕  杨启国  杨福锁
作者单位:1. 云南省楚雄师范学院,云南,楚雄,675000
2. 云南省楚雄农业学校,云南,楚雄,675000
基金项目:云南省自然科学基金;云南省学术技术带头人后备人才项目;楚雄师范学院院级重点建设学科项目
摘    要:目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统。方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗;以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2,4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化;测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素(Gent.)的敏感性。结果以青羊参的种子及茎段做外植体,以10%次氯酸钠消毒种子20~30min,或以0.2%HgCl2消毒茎段3min建立无菌苗具有最好效果;青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织;2,4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的;青羊参对KT较为敏感,不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成,还是诱导胚芽或腋芽形成,均有较好效果;以MS为基本培养基,以2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果;以MS 2,4-D0.5mg/L KT0.5mg/L继代愈伤组织具有较好效果;以MS KT0.5mg/L NAA0.1mg/L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果;青羊参的愈伤组织不论来源于种子,还是来源于根、茎、叶,不论使用激素6-BA,还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽;100μg/mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力。结论通过基因枪介导转基因时,选择种子或茎段在MS 2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L培养基上萌动14d,形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好。

关 键 词:青羊参  组织培养  愈伤组织  不定芽  遗传转化  选择压力
文章编号:0253-2670(2007)11-1707-06
收稿时间:2/5/2007 12:00:00 AM
修稿时间:2007-02-05

Tissue culture system of Cynanchum otophylum in genetic transformation
QIU Lu,WANG Bo,FAN Shu-guo,LUO Chun-mei,LI Yan-hu,CHEN Kai,ZHOU Yin-yan,YANG Qi-guo and YANG Fu-suo.Tissue culture system of Cynanchum otophylum in genetic transformation[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2007,38(11):1707-1712.
Authors:QIU Lu  WANG Bo  FAN Shu-guo  LUO Chun-mei  LI Yan-hu  CHEN Kai  ZHOU Yin-yan  YANG Qi-guo and YANG Fu-suo
Institution:1. Chuxiong Normal University, Chuxiong 675000, China; 2. Chuxiong Agricultural School, Chuxiong 675000, China
Abstract:
Keywords:Cynanchum otophylum Schneid  tissue culture  callus  adventitious bud  genetic transformation  optimum pressure
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