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血人参总黄酮纯化工艺的优化及其对酪氨酸酶的抑制作用研究
引用本文:杨姗.血人参总黄酮纯化工艺的优化及其对酪氨酸酶的抑制作用研究[J].世界科学技术-中医药现代化,2022,24(9):116-125.
作者姓名:杨姗
作者单位:贵州中医药大学
基金项目:国家自然科学基金委员会贵州喀斯特中心项目(U1812403):喀斯特地区特色民族医药若干基础问题研究,负责人:郝小江;国家自然科学基金委员会青年项目(81903517):基于结核杆菌细胞壁合成途径关键酶-UDP-半乳糖变异酶抑制剂的设计、合成及抗结核活性研究,负责人:傅建;贵州省科学技术厅(黔科合支撑[2021]一般411):差示扫描荧光法快速筛选贵州特色民族药DprE1抑制剂及抗结核活性研究与示范,负责人:傅建。
摘    要:目的 优化大孔吸附树脂分离纯化血人参总黄酮的工艺条件,研究血人参总黄酮对酪氨酸酶的抑制作用。方法 以吸附率、解吸率等为考察指标,采用静态吸附-解吸试验对6种不同型号的大孔吸附树脂进行筛选,优选最佳的树脂型号。采用单因素试验考察上样液pH、上样液浓度、上样体积、上样体积流量、洗脱溶剂、洗脱液体积流量、洗脱剂体积对血人参总黄酮纯化的影响,确定最佳纯化工艺;以L-酪氨酸、L-多巴为底物,测定血人参总黄酮对酪氨酸单酚酶和二酚酶的抑制作用,并对其抑制机理和抑制类型进行分析。结果 AB-8型大孔吸附树脂对血人参总黄酮的分离纯化效果最好。最佳纯化工艺参数为:上样液pH为4、上样体积为70 mL(4.7 BV)、上样体积流量为1 mL·min-1、上样液浓度为5.38 mg·mL-1、洗脱溶剂为70%乙醇、洗脱剂体积流量为3 mL·min-1、洗脱剂体积为120 mL(8 BV),血人参总黄酮对酪氨酸单酚酶和二酚酶均有抑制作用,其最大半数抑制浓度分别为88.78 mg·L-1和36.46 mg·L-1,对二酚酶的抑制类型为可逆非竞争性抑制。结论 AB-8型大孔吸附树脂可用于纯化血人参总黄酮,纯化后血人参总黄酮的纯度为46.01%,建立的工艺条件稳定可靠。纯化后的血人参总黄酮对酪氨酸酶有抑制作用,抑制类型为可逆非竞争性抑制。

关 键 词:血人参  总黄酮  大孔吸附树脂  酪氨酸酶  非竞争性抑制
收稿时间:2021/7/29 0:00:00
修稿时间:2022/12/8 0:00:00

Optimization of purification process of total flavonids from Indigofera stachyodes Lindl and its inhibitory effect on tyrosinase
yangshan.Optimization of purification process of total flavonids from Indigofera stachyodes Lindl and its inhibitory effect on tyrosinase[J].World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine,2022,24(9):116-125.
Authors:yangshan
Institution:University of Traditional Chinese Medicine
Abstract:
Keywords:Indigofera stachyodes Lindl    Total flavonoids  Macroporous absorption resins  Tyrosinase  Non-competitive inhibition
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