| 摘 要： | 目的:从JAK2/STAT5信号转导通路探讨黄芪甲苷、毛蕊异黄酮及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞的调控机制。方法:C57BL/6小鼠20只,雌雄各半,28~32 g。给模型组小鼠每日腹腔注射一次环磷酰胺380 mg·kg-1,正常小鼠腹腔注射等量生理盐水,连续3 d。造模后,以脱颈椎法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水反复冲洗骨髓腔,并将冲出的骨髓打碎,再用4号针头过滤制成单个细胞悬液,在离心机上2000 r/min,离心10 min,去上清液,加入4 m L冷70%乙醇固定,上振荡器摇匀制成骨髓干细胞样本。细胞实验分为6组,包括正常组,模型组,"EPO+(G-CSF)"对照组,毛蕊异黄酮组,黄芪甲苷组,两药配伍组。直接给药黄芪甲苷0.2 mg/m L、毛蕊异黄酮0.01 mg/m L、EPO 50 U/m L、(G-CSF)50 U/m L于骨髓干细胞体外培养体系中,培养3 d,室内18~20℃,20%相对湿度,5%CO2,37℃孵育箱。采用蛋白质印迹Western-blot检测p JAK2和p STAT5的蛋白表达,采用RT-q PCR法检测骨髓干细胞中SOCS3的m RNA表达。结果:(1)对SOCS3m RNA表达的影响。与模型组比较,正常组和各治疗组均有明显差异(P0.05)。治疗组之间比较,毛蕊异黄酮组、黄芪甲苷组、两药配伍组3组之间的两两比较均无显著差异(P0.05)。与对照组比较,黄芪甲苷组、蕊异黄酮组、两药配伍组均无显著差异(P0.05)。(2)对p JAK2蛋白表达的影响。与模型组比较,正常组和各治疗组均有明显差异(P0.05)。治疗组之间比较,3组之间的两两比较均无显著差异(P0.05)。与对照组比较,毛蕊异黄酮组、两药配伍组均无显著差异(P0.05)。(3)对p STAT5蛋白表达的影响。与模型组比较,正常组和各治疗组均有明显差异(P0.05)。治疗组之间比较,毛蕊异黄酮组、黄芪甲苷组、两药配伍组3组之间的两两比较均无显著差异(P0.05)。与对照组比较,黄芪甲苷组、蕊异黄酮组、两药配伍组均无显著差异(P0.05)。结论:黄芪甲苷、毛蕊异黄酮及其配伍通过促进p JAK2、p STAT5蛋白表达,下调SOCS3 m RNA表达,保护化疗后骨髓抑制,促进骨髓造血损伤修复。
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