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提高O-糖基化水平对CHO-K1细胞突变型tau蛋白过度磷酸化的影响
引用本文:王景景,郑晨,丁楠,熊慧,宋金芝,赵纲,邓艳秋.提高O-糖基化水平对CHO-K1细胞突变型tau蛋白过度磷酸化的影响[J].山东医药,2013,53(2):25-28.
作者姓名:王景景  郑晨  丁楠  熊慧  宋金芝  赵纲  邓艳秋
作者单位:1. 天津医科大学,天津,300070
2. 天津肿瘤医院
基金项目:国家自然科学基金资助项目,美国NIH FIRCA国际合作项目
摘    要:目的观察提高O-糖基化水平对CHO-K1细胞中突变型R406W tau蛋白过度磷酸化及细胞轴突转运功能的影响。方法分别将突变型PSG-5 R406W tau质粒和PSG-5空载体质粒转染CHO-K1细胞。将成功转染PSG-5 R406W tau质粒的CHO-K1细胞分为实验组与对照组,分别加入20μM的NAG-Ae及等量的DMEM/F12培养基,转染PSG-5空载体的细胞为空载体组,培养12 h。用Western blot法检测tau蛋白表达;免疫印迹法检测实验组与对照组细胞tau蛋白的糖基化及磷酸化水平;荧光漂白后恢复技术(FRAP)检测三组细胞漂白后荧光恢复的速度以表示细胞轴突转运速度。结果转染空载体的细胞未见tau蛋白表达,转染PSG-5 tau R406W的细胞tau蛋白呈高表达。实验组与对照组细胞O-糖基化水平分别为1.30±0.09、0.59±0.04(P<0.05)。实验组tauThr205、tauS-er396、tauThr212位点磷酸化水平分别为0.44±0.21、0.98±0.01、0.44±0.19,对照组分别为1.11±0.38、1.34±0.22、0.79±0.05,两组相比,P均<0.05。10、40、70 s时实验组荧光强度分别为262.00±12.50、300.00±10.00、461.66±10.40,对照组分别58.33±10.40、131.66±11.54、208.33±14.43,空载体组分别为514.00±10.14、888.33±11.06、1188.00±10.60,三组相比,P均<0.05。结论提高CHO-K1细胞的O-糖基化水平有助于减轻突变型tau蛋白的过度磷酸化水平,改善细胞轴突转运功能。

关 键 词:葡萄糖胺酶抑制剂  NAG-Ae  O-糖基化  tau蛋白  磷酸化  神经退行性疾病

Effect of increased O-GIcNAcylation on the hyperphosphorylation induced by overexpression of mutant tau protein on CHO-K1 cells
WANG Jing-jing , ZHEN Chen , DING Nan , XIONG Hui , SONG Jin-zhi , ZHAO Gang , DENG Yan-qiu.Effect of increased O-GIcNAcylation on the hyperphosphorylation induced by overexpression of mutant tau protein on CHO-K1 cells[J].Shandong Medical Journal,2013,53(2):25-28.
Authors:WANG Jing-jing  ZHEN Chen  DING Nan  XIONG Hui  SONG Jin-zhi  ZHAO Gang  DENG Yan-qiu
Institution:1 Tianjin Medical University,Tianjin 300070,P.R.China)
Abstract:
Keywords:
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