胰腺癌Capan-2细胞与树突状细胞融合诱导特异性抗癌免疫应答的体外研究 |
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引用本文: | 陈江,许文达,李宏宇,赵家钧,郭晓钟.胰腺癌Capan-2细胞与树突状细胞融合诱导特异性抗癌免疫应答的体外研究[J].临床肝胆病杂志,2016(5):880-884. |
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作者姓名: | 陈江 许文达 李宏宇 赵家钧 郭晓钟 |
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作者单位: | 沈阳军区总医院消化内科,沈阳,110016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(81071982) |
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摘 要: | 目的观察人胰腺癌Capan-2细胞与树突状细胞(DC)融合后诱导的特异性抗肿瘤免疫反应。方法收集2013年4月-2015年3月于沈阳军区总医院消化科就诊的人类白细胞抗原(HLA)-A2~+胰腺癌患者6例,从患者外周血单个核细胞中分离并培养DC。所获DC分为3组:(1)使用聚乙二醇-二甲基亚砜诱导法,将DC与Capan-2细胞融合以负载肿瘤抗原;(2)DC与Capan-2细胞共培养;(3)单独DC培养。通过流式细胞术检测PE-MUC4/FITC-CD86抗体双标细胞评估融合率;应用四甲基偶氮唑盐法检测各组DC的存活率变化。使用干扰素(IFN)γ酶联免疫法检测DC诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)活化反应。采用51Cr标准细胞毒实验检测DC诱导的抗原特异性CTL对体外胰腺癌细胞的杀伤作用。多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果DC与Capan-2融合细胞同时表达DC表型(CD86)和MUC4分子,CD86与MUC4双阳性表达率为(38.30±7.30)%,明显高于共培养组(7.21±1.06)%;融合细胞组DC存活率呈时间依赖性下降,转染后96 h的存活率降低至62.81%,而与Capan-2细胞共培养组DC存活率稳定在80%以上,两组间差异有统计学意义(P0.05)。DC-Capan-2融合细胞诱导的CTL 24 h IFNγ释放量为(85.34±2.97)U/ml,DC、Capan-2共培养组DC诱导的IFNγ释放量为(19.07±4.25)U/ml,两转染组的差异有统计学意义(P0.05)。DC-Capan-2融合细胞诱导的特异性CTL能够有效识别和杀伤HLA-A2~+/MUC4~+的Capan-2细胞及HLAA2~+/MUC4-的PANC-1细胞,但不能有效识别和杀伤HLA-A2-/MUC4-的Mia Pa Ca-2细胞和HLA-A2-/MUC4~+的As PC-1细胞。结论胰腺癌细胞与DC融合后可诱导出显著的CTL抗肿瘤免疫反应,此过程受主要组织相容性复合体Ⅰ类抗原呈递的限制。
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关 键 词: | 胰腺肿瘤 树突细胞 T淋巴细胞 细胞毒性 细胞融合 |
Specific antitumor immune response induced by infusion of Capan-2 pancreatic cancer cells and dendritic cells: an in vitro study |
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Abstract: | |
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Keywords: | pancreatic neoplasms dendritic cells T lymphocytes cytotoxic cell fusion |
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