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HBC通过NEU1调控肝癌细胞中基因表达的初步研究
引用本文:张宁,李楠,袁东晨,余彤,李奇,孔凡运,尤红娟,汤仁仙.HBC通过NEU1调控肝癌细胞中基因表达的初步研究[J].中国病原生物学杂志,2021(1):22-26,31.
作者姓名:张宁  李楠  袁东晨  余彤  李奇  孔凡运  尤红娟  汤仁仙
作者单位:徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室江苏省免疫与代谢重点实验室;徐州医药高等职业学校护理系基础教研室
基金项目:国家自然科学基金青年项目(No.81702053);江苏省自然科学基金青年项目(No.BK20170263);江苏省卫健委科研项目(No.Z2018017)。
摘    要:目的探讨乙肝病毒核心蛋白(hepatitis B virus C protein,HBC)对唾液酸酶1(neuraminidase 1,NEU1)及相关基因表达的影响。方法通过脂质体将pcDNA3.1和pcDNA3.1-HBC质粒分别转染HepG2细胞和Huh7细胞,采用Quantitative real-time-PCR(q-PCR)及Western blot检测NEU1的表达;PCR扩增NEU1基因并与pcDNA3.1载体质粒连接,构建NEU1过表达质粒pcDNA3.1-NEU1;将pcDNA3.1-NEU1和对照质粒分别转染HepG2细胞,收集细胞,进行转录组测序,获得差异表达基因,用q-PCR对差异表达基因进行验证;将pcDNA3.1-HBC和对照质粒转入肝癌细胞,q-PCR检测HBC对NEU1相关的差异表达基因的影响;在HBC阳性肝癌细胞,利用NEU1的小干扰质粒抑制其表达,q-PCR检测HBC是否通过NEU1调控相关基因的表达。结果与对照组肝癌细胞相比,转染HBC质粒的肝癌细胞NEU1表达显著上调;PCR鉴定pcDNA3.1-NEU1插入片段正确,重组质粒构建成功;转录组测序显示,与对照组比较,过表达NEU1的HepG2细胞有8个基因表达显著不同,其中6种基因表达上调,2种基因表达下调;q-PCR检测转录组测序获得的差异表达基因与转录组测序的结果一致;与对照肝癌细胞相比,NEU1相关的上调差异表达基因在HBC阳性肝癌细胞中高表达,且干扰NEU1表达后以上基因在HBC阳性肝癌细胞中表达下调;与NEU1相关的下调差异表达基因在HBC基因组中低表达,且干扰NEU1表达后相关基因在HBC阳性肝癌细胞中表达上调。结论HBC能够通过NEU1调控肝癌细胞中相关基因的表达。

关 键 词:乙肝病毒核心蛋白  肝细胞癌  唾液酸酶1  基因表达

Hepatitis B virus core protein regulates the gene expression through Neuraminidase 1 in hepatoma cells
ZHANG Ning,LI Nan,YUAN Dong-chen,YU Tong,LI Qi,KONG Fan-yun,YOU Hong-juan,TANG Ren-xian.Hepatitis B virus core protein regulates the gene expression through Neuraminidase 1 in hepatoma cells[J].Journal of Pathogen Biology,2021(1):22-26,31.
Authors:ZHANG Ning  LI Nan  YUAN Dong-chen  YU Tong  LI Qi  KONG Fan-yun  YOU Hong-juan  TANG Ren-xian
Institution:(Department of Pathogen Biology and Immunology,Jiangsu Key Laboratory of Immunology and Metabolism,Xuzhou Medical University,Basic Teaching and Research Section,Jiangsu,China 221004;Department of Nursing,Xuzhou Vocational School of Health)
Abstract:
Keywords:Hepatitis B virus core protein  hepatocellular carcinoma  neuraminidase 1  gene expression
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