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应用rDNA-ITS2诊断性序列现场对3种重要蚊媒的鉴定
引用本文:耿艺介,高世同,黄达娜,庾蕾,张仁利.应用rDNA-ITS2诊断性序列现场对3种重要蚊媒的鉴定[J].中国病原生物学杂志,2008,3(8).
作者姓名:耿艺介  高世同  黄达娜  庾蕾  张仁利
作者单位:深圳市疾病预防控制中心寄生虫防制科,广东深圳,518020
摘    要:目的 建立利用核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)诊断性序列鉴别蚊媒的分子生物学方法. 方法 根据淡色库蚊、白纹伊蚊、嗜人按蚊rDNA-ITS2基因两侧的5.8S和28S保守区设计诊断性引物,进行3种蚊虫的rDNA-ITS2克隆鉴定,并利用其rDNA-ITS2特征进行现场蚊虫的鉴别. 结果 诊断性引物对于淡色库蚊、白纹伊蚊、嗜人按蚊DNA模板的扩增产物分别为440、514和558 bp,3种蚊虫阳性克隆的测序结果与GenBank-blast相应蚊种rDNA-ITS2序列的同源性均为99%.用Biosept、DNAstar等软件分别分析发现各蚊虫克隆的个体间存在一定程度的单核苷酸多态性(SNP).将现场采集的蚊虫诊断性引物扩增产物进行阳性克隆进行序列测定和分析,显示与淡色库蚊阳性对照的一致性为99%;与GenBank中淡色库蚊rDNA-ITS2基因的同源性为99%. 结论 通过对淡色库蚊、白纹伊蚊、嗜人按蚊核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)基因的序列分析,表明3种蚊媒的rDNA-ITS2基因具有可鉴别的种属特异性.利用同一体系的共享引物扩增,可以建立适用于3种蚊媒的现场鉴定方法.

关 键 词:淡色库蚊  白纹伊蚊  嗜人按蚊

Identification on the three kinds of mosquitoes using diagnostic rDNA-ITS2 sequence
GENG Yi-jie,GAO Shi-tong,HUANG Da-na,YU Lei,ZHANG Ren-li.Identification on the three kinds of mosquitoes using diagnostic rDNA-ITS2 sequence[J].Journal of Pathogen Biology,2008,3(8).
Authors:GENG Yi-jie  GAO Shi-tong  HUANG Da-na  YU Lei  ZHANG Ren-li
Abstract:
Keywords:rDNA-ITS2
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