肺纤维化大鼠上皮细胞凋亡及Bcl-xl和Bid动态变化

目的 探讨肺纤维化大鼠中Bcl-2家族部分蛋白介导的线粒体途径引起上皮细胞凋亡的动态变化及相关关系.方法 选取SD大鼠48只,随机分为4组:空白对照组(24只)、模型7d组(8只)、模型14 d组(8只)、模型28 d组(8只).应用博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,空白对照组注入等量生理盐水,各组动物于第7、14、28天随机处死8只,取肺组织采用HE染色观察病理变化,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡,RT-PCR和免疫组化法分别检测肺组织Bid、Bcl-xl mRNA以及蛋白的表达.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、肺泡炎与纤维化并存(14 d)及稳定的肺纤维化(28 d)等表现；同时间段模型组肺组织细胞凋亡指数、Bid mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组(P＜0.01),Bcl- xl mRNA及蛋白表达显著低于空白对照组(P＜0.01);模型组细胞凋亡与Bid蛋白及mRNA从第7天开始逐步升高,第28天达最高峰,Bid mRNA与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.8275,t =7.937 5,P＜0.01)；模型组Bcl-xl蛋白与Bcl-xl mRNA表达在第7天开始下降,第28天达最低峰,Bcl-xl mRNA与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.633 8,t=-4.489,P＜0.01); Bcl-xl mRNA与Bid mRNA无明显相关性(r=-0.3869,t=-2.2986,P＞0.05).结论 细胞凋亡在肺纤维形成中起重要作用,肺纤维化细胞凋亡可能与Bcl-2家族蛋白的表达失衡有关.

Expression of Bcl-xl/Bid and apoptosis in epithelial cells of pulmonary fibrosis rats