PEG-5000修饰后假丝酵母尿酸酶的基本特性 |
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引用本文: | 孙晓军,金磊,甘志勇,刘冬.PEG-5000修饰后假丝酵母尿酸酶的基本特性[J].中国老年学杂志,2010,30(19). |
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作者姓名: | 孙晓军 金磊 甘志勇 刘冬 |
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作者单位: | 重庆医科大学药学院,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆,400016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的基本特性,为治疗高尿酸血症相关疾病药物做基础研究。方法用相对分子量5kD,活化基团为羟基琥珀亚氨的PEG作为专一性修饰剂对尿酸酶进行修饰,采用常规酶学分析方法,分别研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的动力学参数,并比较修饰前后对抑制剂黄嘌呤的敏感性、最适温度、最适pH值、37℃时的稳定性以及在体半衰期等方面的差异。结果经PEG修饰后尿酸酶最适温度由30℃升为35℃,最适pH无改变仍为pH8.7;在37℃水浴下,24h后活性保留由40%增至70%,酶稳定性提高,体内半衰期由45min延长至11h;测定尿酸酶和PEG化尿酸酶的Km分别为32.40、36.34μmol/L,黄嘌呤对尿酸酶与PEG化尿酸酶抑制常数分别为4.72、11.30μmol/L。结论假丝酵母尿酸酶经PEG5kD修饰后有药用潜力。
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关 键 词: | 高尿酸血症 尿酸酶 PEG修饰 稳定性 |
Research on PEG5000 modification uricase from candida utilis |
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