炎症小体在肠神经胶质细胞激活中的表达及短双歧杆菌的干预作用研究

目的:观察炎症小体NALP3在脂多糖(LPS)激活的肠神经胶质细胞(EGCs)中的作用以及短双歧杆菌的干预作用。方法:采用LPS激活肠神经胶质细胞为肠神经胶质细胞的体外肠道炎症模型,造模后采用短双歧杆菌上清液干预。实验分组:空白组、炎症模型组(LPS干预组5 mg/孔)、短双歧杆菌干预组(MOI 1:40=上清液105μL/5×105cells),采用免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及炎症小体NALP3的表达,PCR及Western blot分别检测NALP3,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-1),白介素1β(IL-1β),转录因子(NF-κB)的RNA和蛋白的变化。结果:免疫荧光显示肠神经胶质细胞在LPS激活后表达GFAP、NALP3,而空白组仅表达GFAP; RTPCR及Western blot显示肠神经胶质细胞在LPS激活后较空白组高表达NALP3、Caspase-1、IL-1β、NF-κB RNA和蛋白,而短双歧杆菌干预组较肠神经胶质细胞LPS刺激炎症模型组明显下调NALP3、Caspase-1、IL-1β、NF-κB RNA和蛋白的表达。结论:肠神经胶质细胞在LPS刺激后NALP3高表达,Caspase、IL-1β,NF-κB高表达,而短双歧则下调上述炎性因子的表达。