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FoxO1基因沉默对胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗的影响及其机制
引用本文:饶小娟,秦贵军,马晓君,李雪峰.FoxO1基因沉默对胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗的影响及其机制[J].中华内分泌代谢杂志,2010,26(1):484-488.
作者姓名:饶小娟  秦贵军  马晓君  李雪峰
作者单位:郑州大学第一附属医院内分泌科,450052;
基金项目:河南省医学科技攻关项目
摘    要:目的 探讨抑制叉头状转录因子O1(FoxO1)基因表达对胰岛素抵抗HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响及可能机制.方法 构建针对转录因子FoxO1 mRNA特异性的携带红色荧光标记的siRNA载体,并测序鉴定.高浓度(10-6mol/L)胰岛素诱导24 h建立胰岛素抵抗细胞模型.实验共分4组:A组为普通培养基培养的细胞组;B组为未处理胰岛索抵抗细胞组;C组为转染FOxO1 siRNA载体的胰岛素抵抗细胞组;D组为以转染试剂为对照的胰岛素抵抗细胞组.转染后荧光显微镜下观察红色荧光的表达;葡萄糖氧化酶法检测各组细胞葡萄糖的消耗;RT-PCR技术检测FOxO1 mRNA表达;Western印迹和免疫沉淀技术检测胰岛素受体底物2(IRS-2)蛋白表达及酪氨酸磷酸化水平.结果 经测序,成功构建了FoxO1 siRNA 载体.在转染后48 h,细胞内红色荧光表达最强.此时,与A组比较,B组葡萄糖消耗量降低(P<0.01),FoxO1 mRNA表达增强(P<0.05),IRS-2蛋白表达无显著性差别(P>0.05),但其酪氨酸磷酸化明显降低(P0.05).结论 抑制FoxO1基因在胰岛素抵抗细胞中的高表达,可改善胰岛素敏感性,其机制可能是通过反馈调节IRS-2蛋白酪氨酸磷酸化,增强胰岛素信号转导.

关 键 词:胰岛素抵抗    叉头转录因子    RNA干扰    胰岛素受体底物2    

Effect of FoxO1 gene silence on the glucose consumption in insulin resistant cells and its mechanism
RAO Xiao-juan,QIN Gui-jun,MA Xiao-jun,LI Xue-feng.Effect of FoxO1 gene silence on the glucose consumption in insulin resistant cells and its mechanism[J].Chinese Journal of Endocrinology and Metabolism,2010,26(1):484-488.
Authors:RAO Xiao-juan  QIN Gui-jun  MA Xiao-jun  LI Xue-feng
Abstract:
Keywords:Insulin resistanceFoxO1RNA interferenceInsulin receptor substrate-2
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