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| 靶向B7-H3基因RNA干扰慢病毒的构建及人胰腺癌PaTu8988稳定感染细胞株的建立 | |
| 引用本文： | 赵鑫,张光波,李智,干文娟,朱东明,赵华,张子祥,李德春.靶向B7-H3基因RNA干扰慢病毒的构建及人胰腺癌PaTu8988稳定感染细胞株的建立[J].中华胰腺病杂志,2013,13(2):110-113. |
| 作者姓名： | 赵鑫 张光波 李智 干文娟 朱东明 赵华 张子祥 李德春 |
| 作者单位： | 1. 苏州大学附属第一医院普外科,苏州,215006 2. 临床免疫研究室,江苏省医学重点实验室,江苏省临床免疫研究所 3. 苏州大学附属第一医院介入科,苏州,215006 4. 苏州大学附属第一医院病理科,苏州,215006 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(项目编号：81001138),江苏省普通高校研究生科研创新计划(项目编号：CXZZ11_0125)苏州市科技计划(项目编号：SYS201120)苏州大学优秀博士学位论文选题立项(项目编号：2011一般资助-14) |
| 摘 要： | 目的 构建靶向人B7同源性3(B7-H3)基因的小发夹RNA(shRNA)的慢病毒载体,并建立稳定感染的胰腺癌PaTu8988细胞株.方法 根据GenBank提供的B7-H3 cDNA序列,设计4条靶向B7-H3的siRNA序列,构建重组干扰质粒pGCSIL-GFP-B7-H3-shRNA.将重组干扰质粒和过表达B7-H3质粒共同转染293T细胞,经蛋白质印迹法筛选出干扰效果最佳的重组干扰质粒.该质粒经慢病毒包装,并感染胰腺癌PaTu8988细胞株,建立稳定低表达B7-H3细胞株.应用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测细胞B7-H3基因的表达抑制率.结果 携带干扰效果最好的shRNA的慢病毒感染PaTu8988细胞,建立了稳定低表达B7-H3基因的PaTu8988细胞株,其B7-H3 mRNA表达的抑制率达96.8％,B7-H3蛋白表达的抑制率达88.1％.结论 成功构建了人B7-H3-RNAi的慢病毒载体,并建立了稳定感染的低表达B7-H3基因的PaTu8988细胞株. |
| 关 键 词： | 胰腺肿瘤 B7-H3 RNA干扰 慢病毒感染 |
Construction of B7 H3 RNAi lentiviral vector and establishment of its stably infected human pancreatic cancer PaTu88 cell line |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Pancreatic neoplasms B7-H3 RNA interference Lentivirus infections |
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