17β-雌二醇对高氧诱导的鼠视网膜新生血管形成的影响

目的 观察并探讨17β-雌二醇对高氧诱导的鼠视网膜新生血管形成的影响及机制。方法 48只新生Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组和实验组，每组各24只。对照组大鼠分娩完成后与新生鼠一起正常饲养；实验组大鼠分娩完成后立即与新生鼠一起置于高氧环境饲养。对照组和实验组又再分为磷酸盐缓冲液（PBS）干预组（对照组1、实验1）和雌二醇干预组（对照组2、实验组2)，每组各12只大鼠。对照组1和实验组1大鼠分别每日皮下注射PBS 0.1 ml；对照组2和实验组2大鼠分别每日皮下注射雌二醇 1 μg。每日观察鼠的发育情况。出生后7、14 d逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测视网膜血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）mRNA的含量。出生后14 d时行苏木精 伊红（HE）染色观察视网膜新生血管生长情况；免疫组织化学染色观察VEGF蛋白的表达；透射电子显微镜观察视网膜超微结构变化。结果出生后14 d各组大鼠标本中突破内界膜的内皮细胞数比较，差异有统计学意义（F=10.7，P＜0.05）。其中，实验组1较对照组1明显增多，差异有统计学意义（q=4.28,P＜0.05）。实验组2较实验组1明显减少，差异有统计学意义（q=5.16，P＜0.05）。实验组2与对照组1比较，差异无统计学意义（q=0.25，P＞0.05）。出生后14 d各组大鼠VEGF蛋白表达比较，差异有统计学意义（F=10.7，P＜0.05）。其中，实验组1与对照组、实验组2比较，差异有统计学意义（q=5.41，4.35，P＜0.05）。视网膜超微结构显示，实验组1神经节细胞肿胀，细胞质淡染，线粒体空泡形成；其他各组视网膜超微结构正常。出生后7、14 d各组大鼠视网膜VEGF、HIF-1 mRNA表达比较，差异均有统计学意义（F=14.7，16.1，13.4，17.5；P=0.001，0.005，0.003，0.009）。其中，出生后7 d，对照组2 VEGF表达高于对照组1，实验组2VEGF表达高于实验组1，组间比较，差异均有统计学意义（q=5.22,4.32；P＜0.05）。出生后14 d，对照组2 VEGF表达高于对照组1，实验组2 VEGF、HIF-1表达低于实验组1，组间比较，差异均有统计学意义（q=3.72,5.12,4.08；P均＜0.05）。结论雌二醇对VEGF mRNA具有双重调控作用，高氧条件下促进视网膜VEGF表达和视网膜血管发育；正常氧条件下通过HIF-1α-VEGF系统抑制视网膜新生血管形成。雌二醇在一定程度上可保护缺氧造成的视网膜超微结构损害。