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基于CRISPR/Cas的大肠埃希菌分子标志物的监测研究
引用本文:梁文娟,张荣光,段广才,洪丽娟,张冰,郗园林,杨海燕,陈帅印,娄婷叶,赵永新.基于CRISPR/Cas的大肠埃希菌分子标志物的监测研究[J].中华流行病学杂志,2016,37(8):1080-1086.
作者姓名:梁文娟  张荣光  段广才  洪丽娟  张冰  郗园林  杨海燕  陈帅印  娄婷叶  赵永新
作者单位:450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;450001 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系;453100 新乡医学院第一附属医院检验科;453003 新乡医学院第三附属医院检验科
基金项目:国家科技重大专项(2013ZX10004607);新乡医学院分子诊断与医学检验技术河南省协同创新中心(XTCX-2015-PY4)
摘    要:目的 探讨基于CRISPR/Cas的大肠埃希菌分子标志物的监测研究。方法 通过BLAST收集GenBank数据库中135株全基因组测序大肠埃希菌、203株鸟枪法测序大肠埃希菌的CRISPR/Cas和PCR扩增、测序获得本实验室保存361株大肠埃希菌(包括38株大肠埃希菌O157:H7)的CRISPR序列,应用CRISPR Finder在线软件分析CRISPR特征、DNAMAN软件进行间隔序列的比对,使用Clustal Ⅹ进行cas多序列比对和Mega 5.1软件构建系统进化树。结果 本研究以全新的视角对大肠埃希菌的CRISPR/Cas位置进行描述;结果显示,135株全基因组测序、203株鸟枪法测序和361株本实验室测序的大肠埃希菌中分别有77.04%、100.00%和75.62%的大肠埃希菌具有CRISPR1,分别有74.81%、100.00%和92.24%的大肠埃希菌具有CRISPR2,分别有11.85%、0和1.39%的大肠埃希菌具有CRISPR3和CRISPR4;GenBank数据库下载的全基因组测序的1株和本实验室测序的2株大肠埃希菌存在4个CRISPR位点;缺少cas的CRISPR1下游有插入序列存在。在699株大肠埃希菌中,8株O55:H7、180株O157:H7、8株O157:HNM、40株O104:H4、4株O145:H28有独特的CRISPR;间隔序列的缺失可发生在CRISPR中间;依据I-E和I-F的cas构建系统发育树,均可分为两类。结论 大肠埃希菌的CRISPR/Cas可能作为鉴定强毒株大肠埃希菌或者新型菌株的分子标志物。间隔序列的缺失或获得可能与噬菌体有关。

关 键 词:大肠埃希菌  成簇的规律间隔短回文重复序列  分子标志物
收稿时间:2016/3/21 0:00:00

A surveillance study on CRISPR/Cas molecular biomarker in Escherichia coli
Liang Wenjuan,Zhang Rongguang,Duan Guangcai,Hong Lijuan,Zhang Bing,Xi Yuanlin,Yang Haiyan,Chen Shuaiyin,Lou Tingye and Zhao Yongxin.A surveillance study on CRISPR/Cas molecular biomarker in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Epidemiology,2016,37(8):1080-1086.
Authors:Liang Wenjuan  Zhang Rongguang  Duan Guangcai  Hong Lijuan  Zhang Bing  Xi Yuanlin  Yang Haiyan  Chen Shuaiyin  Lou Tingye and Zhao Yongxin
Institution:Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Henan Innovation Center of Molecular Diagnosis and Laboratory Medicine, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Henan Innovation Center of Molecular Diagnosis and Laboratory Medicine, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Department of Epidemiology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450001, China;Laboratory Department, The First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University, Xinxiang 453100, China;Laboratory Department, The Third Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, China
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/cas  Molecular biomarker
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