LncRNA PCED1B-AS1调控NLRP3促进巨噬细胞清除结核分枝杆菌的机制研究

目的　研究长链非编码RNA PCED1B-AS1调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLR family pyrindomain containing 3, NLRP3）对巨噬细胞清除结核分枝杆菌和分泌炎症因子的影响。方法　在巨噬细胞RAW264.7中转染pcDNA-PCED1B-AS1，并用结核分枝杆菌感染，qRT-PCR方法检测PCED1B-AS1和TNF-α、IL-6 mRNA水平，用菌落形成实验检测巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除作用，Western blot方法检测细胞中NLRP3蛋白表达水平。将NLRP3 小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）和pcDNA-PCED1B-AS1共转染到巨噬细胞中，用结核分枝杆菌感染，同样检测细胞中TNF-α、IL-6 mRNA水平和菌落量。结果　结核分枝杆菌感染后的巨噬细胞中PCED1B-AS1水平降低，TNF-α、IL-6 mRNA水平升高。转染pcDNA-PCED1B-AS1后的巨噬细胞经过结核分枝杆菌感染以后，细胞中PCED1B-AS1、TNF-α、IL-6 mRNA水平升高，形成的菌落量减少，细胞中NLRP3蛋白表达水平升高。NLRP3 siRNA可以逆转过表达PCED1B-AS1对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中TNF-α、IL-6 mRNA表达和菌落量形成的影响。结论　上调PCED1B-AS1促进巨噬细胞清除结核分枝杆菌，诱导细胞表达TNF-α、IL-6 mRNA的机制与上调NLRP3表达有关。

Study on mechanism of lncRNA PCED1B-AS1 regulating NLRP3 to promote clearance of Mycobacterium tuberculosis by macrophages