| Endo G基因过表达对镉诱导HEK-293细胞凋亡影响 |
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| 引用本文： | 周凤云,潘杨滨,何志娟,毛伟平,李文秀,刘宣宣,徐翀.Endo G基因过表达对镉诱导HEK-293细胞凋亡影响[J].中国公共卫生,2012,28(10):1322-1326. |
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| 作者姓名： | 周凤云 潘杨滨 何志娟 毛伟平 李文秀 刘宣宣 徐翀 |
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| 作者单位： | 南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学重点实验室,江苏南京,210046 |
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| 基金项目： | 江苏省高校优势学科建设工程项目 |
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| 摘 要： | 目的 观察细胞凋亡因子核酸内切酶G( endonuclease G,Endo G)基因过表达在镉诱导人胚胎肾细胞HEK-293凋亡中的影响.方法 从人肝癌细胞系(human hepatocarcinoma cells,HepG 2)中提取RNA,经逆转录获取互补DNA cDNA),通过聚合酶链反应(PCR)扩增Endo G基因,与pcDNA 3.0相连,构建pcDNA 3.0-Endo G真核表达载体,转染HEK-293细胞,并结合不同浓度氯化镉处理细胞;通过蛋白印迹实验(Western blot)验证基因过表达,吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双染法及流式细胞术(FCM)检测Endo G基因过表达对镉诱导HEK-293细胞凋亡的影响,噻唑蓝法(MTT)检测细胞存活率.结果 成功构建pcDNA 3.0-EndoG真核表达载体,Endo G基因扩增片段大小约1 100 bp;该载体转染细胞后,Endo G成功过表达,使HEK-293细胞凋亡率＞37％,且随氯化镉浓度增加,Endo G表达量先上升后下降.结论 Endo G以诱导细胞早期凋亡和晚期凋亡为主要形式.
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| 关 键 词： | 氯化镉 pcDNA 3.0 真核表达 核酸内切酶G(Endo G) HEK-293细胞 凋亡 |
Effect of Endo G over-expression on cadmium induced apoptosis of HEK-293 cells |
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| Institution: | ZHOU Feng-yun,PAN Yang-bin,HE Zhi-juan,et al(Jiangsu Province Key Laboratory of Molecular and Medical Biotechnology,College of Life Sciences,Nanjing Normal University,Nanjing,Jiangsu Province 210046,China) |
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