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| 含有纯化标签的重组人表皮生长因子的构建及表达 | |
| 引用本文： | 熊盛,陈宇霞,钱垂文,黄立,张美英,黄文韬,王一飞.含有纯化标签的重组人表皮生长因子的构建及表达[J].中国卫生检验杂志,2006,16(10):1153-1155,1174. |
| 作者姓名： | 熊盛 陈宇霞 钱垂文 黄立 张美英 黄文韬 王一飞 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学药学院制药工程教研室,广州,510630;暨南大学生物医药研究开发基地,广州,510630 2. 暨南大学生物医药研究开发基地,广州,510630 3. 中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;广东省自然科学基金 |
| 摘 要： | 目的:高效表达和制备有活性的人表皮生长因子(hum an ep iderm al growth factor,hEGF)。方法:用DNA重组技术构建EGF基因并插入表达载体pQE-40,与载体上的6×H is标签融合,获得的表达质粒pQE-EGF转化E.coliM15pREP4],得工程菌M15pQE-EGF]。MTT法测定活性,培养工程菌M15pQE-EGF]并诱导目的蛋白表达,镍离子螯合亲和层析纯化重组EGF。结果:所构建的EGF序列正确,重组EGF在大肠杆菌中以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的21.2%,经镍离子亲和层析一步纯化后的重组EGF纯度达90%,得率为94%。复性后的重组EGF具有促Hela细胞生长活性。结论:以E.coliM15pREP4]/pQE-40系统表达EGF具有技术路线简单、目的蛋白得率高、成本低等优点,是一种制备活性hEGF的有效手段。 |
| 关 键 词： | 人表皮生长因子 纯化标签 镍离子螯和亲和层析 Hela细胞 |
| 文章编号： | 1004-8685（2006）10-1153-04 |
| 收稿时间： | 2006-05-15 |
| 修稿时间： | 2006-05-15 |
Construction and expression of recombinant human epidermal growth factor with a purification tag |
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| Xiong Sheng,Cheng Yu-xia,Qian Chui-wen,Huang Li,Zhang Mei-ying,Huang Wen-tao,Wang Yi-fei.Construction and expression of recombinant human epidermal growth factor with a purification tag[J].Chinses Journal of Health Laboratory Technology,2006,16(10):1153-1155,1174. | |
| Authors: | Xiong Sheng Cheng Yu-xia Qian Chui-wen Huang Li Zhang Mei-ying Huang Wen-tao Wang Yi-fei |
| Abstract: | |
| Keywords: | Human epidermal growth factor Purification tag Ni~(2+) chelating chromatography Hela cell |
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