Pyk2基因对肝癌He p3 B细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的：探讨沉默富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（Pyk2）基因对人肝癌Hep3 B细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法构建Pyk2基因RNA干扰（RNAi）载体，脂质体转染至肝癌Hep3B细胞，实验分3组，Pyk2 RNA干扰组（siRNA组）：转染携带Pyk2基因RNAi的质粒；阴性对照组：转染不携带Pyk2基因RNAi的空载质粒；空白对照组：未转染任何质粒。应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blotting鉴定Pyk2基因和蛋白表达；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）、Transwell侵袭和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移等生物学特性。结果 Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2 mRNA 的表达（0．16±0．03）较阴性对照组（0．74±0．13）和空白对照组（0．77±0．16）均明显下降，差异均有统计学意义（t＝51．46，P＝0．000；t＝53．21，P＝0．000）。Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2蛋白的表达（0．24±0．06）较阴性对照组（0．83±0．05）和空白对照组（0．91±0．06）均明显下降，差异均有统计学意义（t＝57．29，P＝0．000；t＝68．53，P＝0．000）。siRNA组48 h细胞增殖抑制率（26．17％±0．28％）较阴性对照组（9．28％±0．22％）和空白对照组（6．47％±0．31％）明显提高，差异均有统计学意义（t ＝31．45，P＝0．004；t＝34．64，P＝0．002）。siRNA组细胞的穿膜细胞数（32．5±8．5）／10 HP明显低于阴性对照组（98．4±12．3）／10 HP和空白对照组（112．6±11．3）／10 HP，差异有统计学意义（t＝95．64，P＝0．000；t＝105．17，P ＝0．000）。siRNA 组的划痕愈合率（28．17％±1．46％）显著低于阴性对照组（77．38％±2．24％）和空白对照组（79．41％±3．17％），差异有统计学意义（t ＝85．86，P＝0．000；t ＝89．37，P＝0．000）。结论 Pyk2基因参与肝癌Hep3B细胞的增殖、侵袭及迁移，与肿瘤发展、侵袭、转移等密切相关，Pyk2有望成为肝癌诊断和治疗的分子靶标。

Targeting Pyk2 gene on the proliferation,invasion and migration induction of hepatocelluar cancer ;Hep3B cells