| 嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的体外构建、扩增及初步功能鉴定 |
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| 引用本文： | 李剑,田芳,姜鹏君,孔祥图,吴坚,殷婷婷,邢芸,金亮,郝瑞栋,刘根桃,朱学军.嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的体外构建、扩增及初步功能鉴定[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2018,25(4):389-393. |
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| 作者姓名： | 李剑 田芳 姜鹏君 孔祥图 吴坚 殷婷婷 邢芸 金亮 郝瑞栋 刘根桃 朱学军 |
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| 作者单位： | 1. 南京中医药大
学附属江苏省中医院 a. 血液科，b. 中心实验室，江苏 南京 210029；2. 中国药科大学 生命科学与技术学院，江
苏 南京 210009；3. 上海科医联创生物科技有限公司，上海 201321 |
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| 基金项目： | 江苏省社会发展-临床前沿技术资助项目（No. BE2016809）；南京市科技发展计划项目资助（No. 201503011） |
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| 摘 要： | 目的： 探索一种特异性靶向 CD19 分子的嵌合抗原受体修饰的 CD19-CAR-T 的构建方法，并明确其体外杀伤
靶细胞的效果。 方法： 运用分子克隆技术，将 PCR 获得的 CD19-CAR 片段构建到 pCDH-GFP 慢病毒载体上，利用包装
的慢病毒颗粒转染供者 CD3 + T 细胞，通过流式细胞术及 PCR鉴定转染效率，并通过 7-AAD染色鉴定扩增得到的CD19-
CAR-T细胞体外杀伤CD19 + Ramos靶细胞的效果。 结果： 经慢病毒转染T细胞在体外培养 10 d 后，CD3 + T 扩增达（78.8±
23.2）倍， （58.3±5.4）%的 CD3 + T 细胞表达 GFP，CD19-CAR-T 体外杀伤 CD19 + Ramos 靶细胞在效靶比5∶1时效率为（57.4±
9.3）%。 结论： 本实验成功建立了一种有效的体外构建及扩增CD19-CAR-T的方法，且具有明显靶向性，为CD19 + B细胞肿瘤临
床治疗提供实验依据。
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| 关 键 词： | CD19嵌合抗原受体 白血病 淋巴瘤 细胞杀伤 |
| 收稿时间： | 2017/12/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/2/8 0:00:00 |
In vitro construction and amplification and primary functional analysis of anti-
CD19 chimeric antigen receptor (CD19-CAR) modified T cells |
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| LI Jian,TIAN Fang,JIANG Pengjun,KONG Xiangtu,WU Jian,YIN Tingting,XING Yun,JIN Liang,HAO Ruidong,LIU
Gentao and ZHU Xuejun.In vitro construction and amplification and primary functional analysis of anti-
CD19 chimeric antigen receptor (CD19-CAR) modified T cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2018,25(4):389-393. |
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| Authors: | LI Jian TIAN Fang JIANG Pengjun KONG Xiangtu WU Jian YIN Tingting XING Yun JIN Liang HAO Ruidong LIU
Gentao and ZHU Xuejun |
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| Institution: | 1 (1. a. Department of Hematology, b. Central Laboratory, Jiangsu Provincial Hospital of TCM Affiliated to Nan-
jing University of Chinese Medicine, Nanjing 210029, Jiangsu, China; 2. College of Life Science and Technology, China Pharmaceuti-
cal University, Nanjing 210009, Jiangsu, China; 3. Shanghai Biomed-Union Biotechnology Co. Ltd., Shanghai 201321, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CD19 chimeric antigen receptor leukemia lymphoma cytotoxicity |
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