埃兹蛋白对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭转移能力影响的初步实验研究

目的探讨人乳腺癌细胞MDA-MB-231中埃兹蛋白(ezrin)稳定下调后,是否通过MMP-9、Src/β-catenin等途径影响细胞的侵袭转移能力。方法慢病毒感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后,将细胞分为实验组231-sh1,实验组231-sh2和阴性对照组231-NC,采用Western blot和免疫荧光法观察ezrin蛋白的干扰效率,用Transwell法观察ezrin表达下调对细胞侵袭转移能力的影响,用Western blot法观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Src/β-连结蛋白(β-catenin)通路相关蛋白的表达情况。各组间均数比较采用单因素方差分析和Post hoc检验(LSD法)。结果慢病毒感染MDA-MB-231细胞后,Western blot显示,与阴性对照组231-NC(1.0083±0.0629)相比,实验组231-sh1(0.3833±0.0326)和231-sh2(0.3342±0.0306)中ezrin蛋白的表达明显降低(P均<0.050)。免疫荧光实验中获得相同的改变(231-NC:30.103±2.243;231-sh1:17.227±1.801;231-sh2:14.857±0.394;P均<0.050)。迁移实验中,与阴性对照组231-NC(940.67±80.507)相比,实验组231-sh1(459.67±51.549)和231-sh2(402.00±52.460)穿膜细胞数均明显减少(P均<0.050)。侵袭实验中获得类似的改变(231-NC:157.33±9.713;231-sh1:96.00±14.731;231-sh2:73.67±13.503;P均<0.050)。实验组231-sh1和231-sh2分别与阴性对照组231-NC相比,MMP-9、Src、P-Src、β-catenin和P-β-catenin表达明显降低(P均<0.050)。结论ezrin表达下调可以降低MDA-MB-231细胞的侵袭转移能力,其可能通过MMP-9以及Src和β-catenin磷酸化的作用机制来影响乳腺癌的侵袭转移能力。