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小干扰RNA抑制人端粒酶逆转录酶基因对胃癌细胞增殖的影响
引用本文:马晋平,陈创奇,赵刚,蔡世荣,吴恺明,吴晖,王昭,何裕隆,詹文华.小干扰RNA抑制人端粒酶逆转录酶基因对胃癌细胞增殖的影响[J].中华实验外科杂志,2010,27(12).
作者姓名:马晋平  陈创奇  赵刚  蔡世荣  吴恺明  吴晖  王昭  何裕隆  詹文华
作者单位:1. 中山大学附属第一医院胃肠胰腺外科,广州,510080
2. 广东省人民医院普通外科
基金项目:国家自然科学基金资助项目,广东省科技计划项目 
摘    要:目的 应用小干扰RNA(siRNA)技术特异性抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因在胃癌SGC7901细胞中的表达,观察其对细胞增殖的影响.方法 hTERT基因的RNA干扰表达重组体用脂质体介导方法转染SGC7901细胞.荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hTERT基因表达.TRAP-PCR法检测端粒酶活性、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖.结果 SGC7901细胞转染前后hTERT基因的表达强度分别为:转染pU6组平均表达量为6.5×105拷贝/μg RNA;转染pU6-hTERT-siRNA Ⅰ组平均表达量为4.1 × 104拷贝/μg RNA;转染pU6-hTERT-siRNAⅡ组平均表达量为5.4×104拷贝/μg RNA.转染pU6组与其余两组P值<0.01;转染pU6-hTERT-siRNA Ⅰ组和转染pU6-hTERT-siRNAⅡ组P值>0.05.端粒酶活性下降,细胞生长速度明显减慢.结论 小干扰RNA能有效抑制SGC7901细胞中hTERT基因表达,hTERT基因表达下调影响SGC7901细胞增殖.

关 键 词:小干扰RNA  RNA干扰  hTERT基因  端粒酶
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