靶向垂体特异转录因子-1的小干扰RNA对大鼠生长激素垂体腺瘤GH3细胞生物学行为的影响

目的 观察小干扰RNA (siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞(GH3)中垂体特异转录因子-1(Pit-1)的基因表达对其生物学行为的影响.方法 设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞.采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定经siRNA转染24 h后；Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达；用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化；用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变；制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化.结果 siRNA显著地抑制Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA的表达水平,分别降低58.18％和75.82％；CCK-8法结果显示siRNA组细胞增长率明显低于与阴性对照组；流式细胞仪分析显示,siRNA组细胞凋亡率(9.250 00±0.996 95)％]较阴性对照组(2.893 30±0.665 16)％]增加；,siRNA组穿过Matrigel胶及滤膜的细胞数(92.91±53.25)个],与阴性对照组(7.50±7.95)个]比较侵袭力明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Pit-1 siRNA能够有效地抑制GH3细胞的生长、促进其凋亡,降低侵袭力.