| Ki-67启动子转录调控结构与功能研究 |
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| 引用本文： | 李中林,钱国伟,徐为,李望,张宝福,刘俊杰,陈菲菲,田卉,章龙珍,郑骏年.Ki-67启动子转录调控结构与功能研究[J].中华实验外科杂志,2010,27(9). |
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| 作者姓名： | 李中林 钱国伟 徐为 李望 张宝福 刘俊杰 陈菲菲 田卉 章龙珍 郑骏年 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院附属医院神经外科,江苏,221002
2. 徐州医学院肿瘤生物治疗实验室 |
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| 摘 要： | 目的 观察Ki-67核心启动子调控元件对转录调控的影响.方法 根据Ki-67启动子结构软件分析结果,对Ki-67核心启动子(-223～+30)内的5个调控区域,包括(+13～+30)及4个潜在Sp1结合位点(-198～-172)、(-170～-144)、(-63～-37)和(-14～+12)进行内部缺失,目的片段缺失的Ki-67核心启动子插入pGL3-Basic载体,构建报告基因重组体质粒.将重组体分别转染肿瘤Hela、SW1990、SGC-7901、A549细胞株,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,并与Ki-67核心启动子质粒pGLBK2+转录活性比较.结果 缺失(+13～+30)的启动子重组体质粒在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著提高,分别达到缺失前的1.2、2.0、1.7、1.4倍.缺失潜在Sp1结合位点的4个启动子重组体在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著降低,其中缺失(-170～-144)后转录活性最小,在4种肿瘤细胞中分别降至未缺失前的16.2%、10.4%、6.7%、12.2%.结论 Ki-67启动子(+13～+30)区包含负性调控元件,对其缺失后形成的新的Ki-67核心启动子(-223～+12)是更好的调控肿瘤基因治疗的启动子.(-198～-172)、(-170～-144)、(-63～-37)和(-14～+12)可能存在潜在的Sp1顺式作用元件,其中-170～-144区域的顺式作用元件最为重要.
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| 关 键 词： | Ki-67基因 启动子 转录调控 |
Structural and functional analysis of human Ki-67 gene promoter |
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| LI Zhong-lin,QIAN Guo-wei,XU Wei,LI Wang,ZHANG Bao-fu,LIU Jun-jie,CHEN Fei-fei,TIAN Hui,ZHANG Long-zhen,ZHENG Jun-nian.Structural and functional analysis of human Ki-67 gene promoter[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2010,27(9). |
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| Authors: | LI Zhong-lin QIAN Guo-wei XU Wei LI Wang ZHANG Bao-fu LIU Jun-jie CHEN Fei-fei TIAN Hui ZHANG Long-zhen ZHENG Jun-nian |
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