| 重组腺病毒体外诱导山羊骨髓间充质干细胞成骨分化的研究 |
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| 引用本文： | 严瀚,徐绘华,郭奇峰,刘青华,刘四红,娄盼,梅勇.重组腺病毒体外诱导山羊骨髓间充质干细胞成骨分化的研究[J].中华显微外科杂志,2013,36(2):156-160. |
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| 作者姓名： | 严瀚 徐绘华 郭奇峰 刘青华 刘四红 娄盼 梅勇 |
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| 作者单位： | 广州医学院附属广州市第一人民医院, 广州,510180 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目(项目编号：2010B031500005),广州市医药卫生科技项目(项目编号：201102A212029)国家自然科学基金面上项目(项目编号：81272941) |
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| 摘 要： | 目的 探讨腺病毒介导骨形态发生蛋白2(BMP2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因体外转染山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)后目的基因表达与诱导成骨情况. 方法 从2岁健康雌性山羊髂骨处骨穿抽取骨髓2ml,利用密度梯度离心法分离培养山羊BMSCs,将前期构建好的腺病毒载体Ad-BMP2-bFGF、Ad-BMP2分2组,以MOI=5000分别转染BMSCs,每2d用ELISA法检测BMP2和bFGF的表达情况,每周用ALP染色试剂盒及定量试剂盒检测ALP表达情况. 结果 Ad-BMP2-bFGF转染BMSCs 48 h后,目的蛋白已有显著表达(BMP2为3996.22 pg/ml、bFGF为1352.15 pg/ml),第6天达到高峰(BMP2为5146.63 pg/ml、bFGF为1434.75pg/ml),与未转染组比较差异有统计学意义(P＜0.05),3周后细胞呈现明显的成骨改变,ALP活性明显增高(266mol/L),Ad-BMP2-bFGF组ALP表达量约为Ad-BMP 2组的1.5倍(P＜0.05). 结论 经Ad-BMP2-bFGF转染的BMSCs具有持续高水平目的蛋白表达活性,转染后的BMSCs表现出明显的成骨活性,成骨活性明显强于Ad-BMP2组.
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| 关 键 词： | 重组腺病毒 骨形态发生蛋白2 碱性成纤维细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 |
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