淫羊藿苷促进大鼠骨髓基质细胞成骨性分化过程中对 p-AKT及eNOS、iNOS表达量的影响

目的研究淫羊藿苷(Icariin. ICA)促进体外培养大鼠骨髓基质细胞（Bone marrow stromal cells . BMSCs)的成骨性分化 机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质细胞并用流式检测细胞纯度。骨髓基质细胞传代至第2代时分别用含有成骨性 诱导剂的 1x10_5 mol/L ICA 和 LY294002 处理 24 h 后用 Real~time RT-PCR 检测 ALP、eNOS 和 iNOS 的 mRNA 表达水平， Western blotting检测ALP、p4KT、eNOS和iNOS的蛋白表达量。结果原代骨髓基质细胞体外培养传代至第2代时纯度可达 95%以上。基因和蛋白质检测均显示ICA可极显著的促进碱性磷酸酶（ALP)的表达（P <0.01), PI3K的特异性抑制剂 LY294002会抑制ICA对ALP的提高,ICA + LY294002组与CON组的表达差别不明显。p^KT的蛋白表达变化与ALP相似。 ICA可以提高eNOS表达(P <0. 01)，加抑制剂能使其降低（P <0. 01),而iNOS的ICA组与ICA + LY294002组无明显差别。 结论ICA促进BMSCs成骨性分化过程涉及到PI3K/AKT通路，且AKT位于eNOS的上游;eNOS和iNOS共同作用，但iNOS 起主要作用。