| miR-381-3p通过靶向ERK1/2/ETS1信号通路影响MC3T3-E1细胞成骨分化 |
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| 引用本文： | 陈锦成,朱国涛,秦晓飞,陈彦丞 罗骏 余博飞 吴宜璟 徐杰.miR-381-3p通过靶向ERK1/2/ETS1信号通路影响MC3T3-E1细胞成骨分化[J].中国骨质疏松杂志,2022(3):325-331. |
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| 作者姓名： | 陈锦成 朱国涛 秦晓飞 陈彦丞 罗骏 余博飞 吴宜璟 徐杰 |
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| 作者单位： | 1.福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室，福建 福州 350122
2.福建省立医院骨二科，福建医科大学，福建 福州350001 |
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| 基金项目： | 福建省自然科学基金面上项目(2019J01173)；2019福建省卫生教育联合攻关项目（2019-WJ-01）；卫生健康委医学创新课题（2019-CX-1） |
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| 摘 要： | 目的 探讨miR-381-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响和作用机制。方法 慢病毒转染细胞后实验分为NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组、NC inhibitor miR-381-3p组和inhibitor miR-381-3p组；运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测不同组miR-381-3p的表达水平以验证转染效率；诱导MC3T3-E1细胞成骨分化后，检测各组细胞中碱性磷酸酶 (ALP) 活性水平；茜素红染色法检测各组细胞的成骨矿化能力；qRT-PCR测定各组细胞中ALP、Runx2、PPARγ和ETS1 mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法测定各组细胞中collagen Ⅰ、ALP、Runx2、PPARγ、ETS1、P-ERK1/2水平；并用MAPK/ERK通路抑制剂（PD98059）干预各组细胞后进行目的蛋白检测。结果 与NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组及NC inhibitor miR-381-3p组比较，inhibitor miR-381-3p组中细胞中ALP、Runx2、ETS1 mRNA的水平均明显升高，并且collagen Ⅰ、ALP、Runx2、ETS1、P-ERK1/2蛋白的表达水平也明显升高，但是PPARγ mRNA和蛋白表达水平是下调的；与其他3组对比，inhibitor miR-381-3p组中细胞的ALP活性和钙化能力检测显示均显著高表达。MAPK通路抑制后蛋白实验结果也佐证了miR-381-3p参与调控MC3T3-E1细胞的成骨分化过程。结论 miR-381-3p通过下调ERK1/2/ETS1信号通路表达水平进而抑制了MC3T3-E1细胞的成骨分化能力。
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| 关 键 词： | 微小RNA 骨质疏松 MC3T3-E1细胞 细胞外信号调节激酶 作用机制 成骨分化 |
miR-381-3p affects the osteogenic differentiation of MC3T3-E1 cells by targeting the ERK1/2/ETS1 signaling pathway |
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| CHEN Jincheng,ZHU Guotao,QIN Xiaofei,CHEN Yancheng,LUO Jun,YU Bofei,WU Yijing,XU Jie.miR-381-3p affects the osteogenic differentiation of MC3T3-E1 cells by targeting the ERK1/2/ETS1 signaling pathway[J].Chinese Journal of Osteoporosis,2022(3):325-331. |
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| Authors: | CHEN Jincheng ZHU Guotao QIN Xiaofei CHEN Yancheng LUO Jun YU Bofei WU Yijing XU Jie |
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| Institution: | 1. Key Laboratory of Orthopedics & Traumatology of Traditional Chinese Medicine and Rehabilitation (Fujian University of TCM), Ministry of Education, Fuzhou 350122, China
2.The Second Department of Orthopedics, Fujian Provincial Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | microRNA osteoporosis MC3T3-E1 cells extracellular signal-regulated kinase mechanism of action osteogenic differentiation |
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