| 关节软骨细胞三维支架双相接种体外生成软骨组织的观察 |
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| 引用本文： | 周强,李起鸿,戴刚,杨柳,许建中.关节软骨细胞三维支架双相接种体外生成软骨组织的观察[J].中华骨科杂志,2002,22(6):372-376. |
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| 作者姓名： | 周强 李起鸿 戴刚 杨柳 许建中 |
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| 作者单位： | 400038,重庆,第三军医大学西南医院骨科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目资助(39830100)，全军“十五”医药卫生科研基金重点课题(01Z072) |
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| 摘 要： | 目的联合应用自制生物凝胶和三维支架材料,建立组织工程种子细胞的三维支架双相接种技术,并对其构建生成组织工程关节软骨的效果进行初步观察。方法酶消化法分离幼兔关节软骨细胞,于培养瓶中接种、培养,收集第1代软骨细胞,以2.5×107/ml加入液态的自制生物凝胶液中充分混均,制成细胞-凝胶混悬液,接种于CPPf/PLLA(caliumpolyphosphatefiber/poly-L-lacticacid)三维支架材料中,经固化后形成工程化组织块,体外连续培养4周。行大体、倒置显微镜以及组织学、Ⅰ型和Ⅱ型胶原免疫组化光镜观察,二甲基亚甲蓝显色法定量检测硫酸糖胺多糖含量。结果(1)细胞-凝胶混悬液接种后完全充满CPPf/PLLA支架的孔隙,固化后三者很好地形成一个工程化组织整体。构建的工程化组织块在培养过程中不仅能够保持其初始外形,而且能保持种子细胞稳定的三维均相分布,无细胞脱落现象。同时,硬度亦不断增加,有弹性,表面湿润、光滑。(2)随着培养时间的延长,软骨组织的形成是由外周向中心进行。培养2周后,逐渐形成富含Ⅱ型胶原和蛋白聚糖、具有典型软骨组织结构的成熟工程化软骨。同时,Ⅰ型胶原逐渐转为阴性,支架材料亦不断降解。4周时硫酸糖胺多糖含量平均为(15.70±2.00)mg/g(湿重),为天然关节软骨的30%以上。结论种子细胞的三维支架双相
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| 关 键 词： | 软骨 关节 软骨细胞 再生 体外研究 |
| 修稿时间： | 2002年1月16日 |
Chondrogenesis of articular chondrocytes following in vitro biphasic seeding into three dimensional scaffold |
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| ZHOU Qiang,LI Qihong,DAI Gang,et al..Chondrogenesis of articular chondrocytes following in vitro biphasic seeding into three dimensional scaffold[J].Chinese Journal of Orthopaedics,2002,22(6):372-376. |
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| Authors: | ZHOU Qiang LI Qihong DAI Gang |
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| Institution: | ZHOU Qiang,LI Qihong,DAI Gang,et al .Department of Orthopaedics,South west Hospital,the Third Military Medical University,Chongqing 400038,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cartilage articular Chondrocyte s Regeneration In vitro |
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