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抗菌肽基因在E.Coli JM109中的克隆表达
引用本文:李启辉,乐国伟,施用晖,王树英.抗菌肽基因在E.Coli JM109中的克隆表达[J].中国脊柱脊髓杂志,2004(6).
作者姓名:李启辉  乐国伟  施用晖  王树英
作者单位:李启辉(江南大学,食品学院,江苏,无锡,214036)       乐国伟(江南大学,食品学院,江苏,无锡,214036)       施用晖(江南大学,食品学院,江苏,无锡,214036)       王树英(江南大学,测试中心,江苏,无锡,214036)
摘    要:合成5条50~70 bp的DNA片段,用"片段拼凑"的方法通过三步PCR扩增得到目的基因,天蚕素基因被克隆到PUC19载体上,再转化大肠杆菌JM109.电泳分析重组质粒,确定天蚕素基因已转化到JM109上.摇床发酵转化子,IPTG诱导表达目的肽,最后提纯表达产物.SDS-PAGE电泳分析表明有特异性带出现,荧光色谱分析表明表达肽与目的肽组成一致,最后确定天蚕素在JM109中得到表达.抑菌圈活性实验表明,表达肽具有一定抗菌活性.

关 键 词:PCR扩增  片段拼凑  诱导SDS-PAGE电泳  色谱分析

Cloning and Expression of Cecropin Gene in E.Coli JM109
LI Qi-hui,LE Guo-wei,SHI Yong-hui,WANG Shu-ying.Cloning and Expression of Cecropin Gene in E.Coli JM109[J].Chinese Journal of Spine and Spinal Cord,2004(6).
Authors:LI Qi-hui  LE Guo-wei  SHI Yong-hui  WANG Shu-ying
Abstract:Five 50-70 bp DNA fragments were synthesized first and then proceeding to 3-step PCR amplification using fragment piecing-together method to get the final full sequence. The fragment was cloned into vector PUC19 and then transformed into E. Coli JM109. Re
Keywords:PCR amplification  fragment piecing-together induction  SDS-PAGE electroph-oresis  chromatography analysis
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