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| 重组35型腺病毒介导人骨形成蛋白基因对脂肪源性干细胞的诱导分化 | |
| 引用本文： | 康焱,廖威明,袁振华,张珑涓,原向伟,雷磊,黄保丁.重组35型腺病毒介导人骨形成蛋白基因对脂肪源性干细胞的诱导分化[J].中国修复重建外科杂志,2007,21(2):125-129. |
| 作者姓名： | 康焱 廖威明 袁振华 张珑涓 原向伟 雷磊 黄保丁 |
| 作者单位： | 1. 中山大学附属第一医院骨关节外科,广州,510080 2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程实验室 3. 中山大学附属第一医院普通外科实验室 |
| 摘 要： | 目的在体外运用人骨形成蛋白7（human bone morphogenetic protein 7，hBMP-7）基因重组35型腺病毒（recombinant adenovirus’s containing fibers derived from B—group serotype 35，rAd5／F35）诱导大鼠脂肪源性干细胞（adipose—derived adult stem cell，ADASC）向成骨细胞定向分化，为骨组织工程探索新的细胞来源。方法以pcDNA1．1／氨苄青霉素-hBMP-7质粒为模板扩增hBMP7基因，将回收的PCR产物片段克隆入pDC316载体，获得重组质粒pDC316-hBMP7。骨架质粒pBHG—fiber5／35和穿梭质粒pDC316-hBMP-7共转染293细胞，同源重组产生rAd5／F35-hBMP-7。同样的方法构建rAd5／F35-增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）。在体外分别转染大鼠ADASC并留置空白对照。观察细胞形态和生长情况，ELISA检测转染基因的转录和表达，检测钙结节和骨钙素等成骨细胞表型。结果PCR、酶切鉴定表明rAd5／F35-hBMP-7质粒构建正确。rAd5／F35-EGFP对大鼠ADAsc中转染效率可达90％以上，hBMP7基因存在于转染后的ADASC中并表达相应的蛋白，诱导组钙结节形成，电镜见胞质中有钙质成分，碱性磷酸酶阳性，骨钙素表达增强。结论rAd5／F35介导hBMP7基因可促进ADASC向成骨细胞定向分化。 |
| 关 键 词： | 腺病毒 脂肪源性干细胞 人骨形成蛋白 基因治疗 |
| 修稿时间： | 2006-08-02 |
DIFFERENTIATION OF ADIPOSE-DERIVED STEM CELLS INDUCED BY RECOMBINANT ADENOVIRUS'S CONTAINING FIBERS DERIVED FROM B-GROUP SEROTYPE 35-MEDIATED BONE MORPHOGENETIC PROTAIN |
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| KANG Yan, LIAO Weiming, YUAN Zhenhua,et al..DIFFERENTIATION OF ADIPOSE-DERIVED STEM CELLS INDUCED BY RECOMBINANT ADENOVIRUS''''S CONTAINING FIBERS DERIVED FROM B-GROUP SEROTYPE 35-MEDIATED BONE MORPHOGENETIC PROTAIN[J].Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery,2007,21(2):125-129. | |
| Authors: | KANG Yan LIAO Weiming YUAN Zhenhua |
| Institution: | Department of Orthopedics, First Affiliated Hospital of SUN Yet-Sen University, Guangzhou Guangdong , 510080, P. R. China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | Adenovirus Adipose derived adult stem cell Human bone morphogenetic protein Gene therapy |
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