| 成骨细胞条件培养液对BMSCs诱导分化作用研究 |
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| 引用本文： | 周昆鹏,陈晓禾,常丽,李秀群,李驯虎,张珏,邓力.成骨细胞条件培养液对BMSCs诱导分化作用研究[J].中国修复重建外科杂志,2009,23(2). |
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| 作者姓名： | 周昆鹏 陈晓禾 常丽 李秀群 李驯虎 张珏 邓力 |
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| 作者单位： | 周昆鹏,陈晓禾,李秀群,ZHOU Kunpen,CHEN Xiaohe,LI Xiuqun(四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室,成都,610041);常丽,李驯虎,CHANG Li,LI Xunhu(北京德得创业科技有限公司);张珏,邓力,ZHANG Jue,DENG Li(四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室,成都,610041;四川大学华西药学院药理系)
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，北京科学技术委员会科技计划重大项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨大鼠成骨细胞条件培养液对同种大鼠BMSCs的成骨诱导分化作用,为骨组织工程种子细胞的获得寻找一种新方法 . 方法 健康1周龄SD大鼠10只,雌雄不限,体重20～30 g,采用贴壁法和酶消化法分别获得BMSCs和成骨细胞,并进行鉴定.无菌条件收集第1～5代成骨细胞培养液上清,与完全培养基1:1混合,制备成骨细胞条件培养液,与第2代BMSCs共培养为诱导组,相同代次BMSCs与完全培养液共培养为对照组.倒置相差显微镜下观察共培养后BMSCs形态变化,MTT法检测BMSCs生长情况,免疫组织化学染色检测共培养后BMSCs的ALP、Col Ⅰ、骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白的表达,采用RT-PCR检测Col Ⅰ、OCN mRNA的表达. 结果 诱导组共培养7 d BMSCs体积变大,细胞由长梭形展开为扁平形和多边形,并带有突起;9 d细胞呈集落状生长.细胞生长曲线示BMSCs数量随培养时间延长而增加,对照组增殖能力较诱导组强;诱导培养4～7 d,对照组细胞数量与诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05).诱导组培养12 d,ALP染色呈阳性表达;18 d 出现钙结节;21 d Col Ⅰ和OCN呈阳性表达;对照组均呈阴性表达.RT-PCR检测示诱导组培养21 d有Col Ⅰ、OCN mRNA表达,对照组未见表达. 结论 体外大鼠成骨细胞条件培养液有明显的诱导同种大鼠BMSCs向成骨样细胞分化的作用.
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| 关 键 词： | 成骨细胞条件培养液 诱导分化 大鼠 |
EFFECT OF OSTEOBLAST CONDITIONED CULTURE MEDIUM ON DIFFERENTIATION OF BMSCs |
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| ZHOU Kunpen,CHEN Xiaohe,CHANG Li,LI Xiuqun,LI Xunhu,ZHANG Jue,DENG Li.EFFECT OF OSTEOBLAST CONDITIONED CULTURE MEDIUM ON DIFFERENTIATION OF BMSCs[J].Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery,2009,23(2). |
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| Authors: | ZHOU Kunpen CHEN Xiaohe CHANG Li LI Xiuqun LI Xunhu ZHANG Jue DENG Li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BMSCs |
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