| 定向敲除牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA的重组质粒构建 |
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| 引用本文： | 杨洁,李宽钰,刘玉,吴娟,孙卫斌.定向敲除牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA的重组质粒构建[J].中华口腔医学杂志,2012,47(11). |
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| 作者姓名： | 杨洁 李宽钰 刘玉 吴娟 孙卫斌 |
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| 作者单位： | 1. 210008,南京大学口腔医学院·南京市口腔医院牙周科
2. 南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，南京市2010年省科技发展计划 |
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| 摘 要： | 目的 构建定向敲除牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)菌毛蛋白FimA基因的质粒pPHU281_A_Spec_B,用于后续构建菌毛蛋白FimA缺陷型Pg,为研究FimA的功能奠定分子基础.方法 厌氧培养PgATCC33277,提取基因组DNA,聚合酶链反应扩增PgFimA基因一定长度的上游A片段及下游B片段,并在扩增片段两端添加合适的酶切位点；利用定向克隆技术将A和B 基因插入到载体自杀质粒pPHU281中,并添加大观霉素抗性基因片段,重组的pPHU281 _A_Spec_B 在大肠杆菌DH-5α内扩增后酶切电泳鉴定并进行DNA测序.结果 通过对重组质粒pPHU281_A_Spec_B进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明重组质粒pPHU281_A_Spec_B构建成功.结论 成功构建了质粒pPHU281_A_Spec_B,有利于菌毛蛋白FimA缺陷型Pg的构建,为深入研究FimA的作用机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 紫单胞菌 龈 菌毛蛋白质类 质粒构建 |
Construction of recombinant plasmid with Porphyromonas gingivalis FimA deficiency |
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| YANG Jie
,
LI Kuan-yu
,
LIU Yu
,
WU Juan
,
SUN Wei-bin.Construction of recombinant plasmid with Porphyromonas gingivalis FimA deficiency[J].Chinese Journal of Stomatology,2012,47(11). |
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| Authors: | YANG Jie LI Kuan-yu LIU Yu WU Juan SUN Wei-bin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Porphyromonas gingivalis Fimbriae proteins Plasmid recombination |
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