辛伐他汀和普罗布考对TNF-α诱导的内皮细胞凋亡的影响

【目的】探讨辛伐他汀和普罗布考对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡的影响及其影响的量效关系和时效关系。【方法】体外培养HUVES，取对数生长期的细胞分为四个组：①TNF-α干预的浓度依赖性组（Ac组）按浓度分为Acl（Ong／mL），Ac2（1ng／mL），Ac3（10ng／mL），Ac4（25ng／mL）]；②TNF-α干预的时间依赖性组（At组）按时间分为Atl（Oh），At2（12h），At3（24h），At4（48h）]；③10ng／mLTNF_a＋不同浓度辛伐他汀干预组（B组）浓度分为B1（O μmol／L），B2（O．01 μmol／L。），B3（O．1 μmol／L。），B4（1．0t μmol／L）]；④1O ng／mL TNF-a不同浓度普罗布考干预组（c组）浓度分为C1 （0 μmol／L。），C2（20 μmol／L），c3（40 μmol／L），C4（80 μmol／L）]。以上四组均干预12h后，用流式细胞术检测各组凋亡率。【结果】①Ac组凋亡率分别为：Acl（O．81±0．25％），Ac2（2．35±0．04％），Ac3（4．54±0．32％），Ac4（6．17±0．28％），各组之间存在统计学差异（P〈0．01）。②At组凋亡率分别为，Atl（0．87±o．35％），At2（4．53±0．32％），At3（7．45±1．97％），At4（10．92±1．27％），各组间存在统计学差异（P〈O．01）。③B组凋亡率分别为，B1（4．46±0．53％），B2（1．38±0．12％），B3（2．89±0．27％），B4（3．65±0．08％），各干预组与对照组之间存在统计学差异（P〈O．01）。④C组细胞凋亡率分别为，C1（4．60±0．64％），C2（2．61±0．18％），C3（2．21±0．22％），c4（1．28±0．34％），各干预组与对照组之间存在统计学差异（P〈0．01）。【结论】①TNF-α可以诱导内皮细胞凋亡，且存在浓度依赖性和时．：良赖性。②辛伐他汀可以抑制TNF-α口诱导的内皮细胞凋亡，但无浓度依赖性。③普罗布考可以抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡，但无浓度依赖性。

Effect of Simvastatin and Probucol on Endothelial Cell Apoptosis Induced by Tumor Necrosis Factor-alpha

Objective] To explore the effect of simvastatin and probucol in the apoptosis of umbilical vein endothelial cells （HUVECs） induced by tumor necrosis factor-alpha（TNF-α） and the dose-effect and time-effect relationship. Methods] HU- VECs were cultured in vitro. The cells for experiments were in logarithmic growth phase. Endothelial cells were divided into four groups including TNF-a concentration-dependent intervention group（Ac group） assigned to Acl group with Ong/mL, Ac2 group with lng/mL, At3 group with 10ng/mL and Ac4 group with 25ng/mL TNF-a, TNF-a time-dependent intervention group（At group） assigned to Atl group（0h）, At2 group（12h）, At3 group（24h） and At4 group（48h）, 10ng/mL TNF-a with different concentrations of simvastatin co-intervention group（group B） assigned to B1 group（0 μmol/L）, B2 group（0. 01pmol/ L）, B3 group（0. 1/＊mol/L） and B4 group（1.0 μmol/L）, and TNF-a with different concentrations of probucol co-intervention group（group C） assigned to C1 group（0 μmol/L）, C2 group（20 μmol/L）, C3 group（40 μmol/L） and C4 group（80 μmol/L）. Af- ter the intervention in each group for 12h, flow cytometry was used to detect cell apoptosis rate. Results] The apoptosis rate of Ac group were 0.81±0.25% （Acl）, 2.35±0.04% （Ac2）, 4.54±0. 32% （Ac3） and 6.17±0.28%（Ac4）, respectively, and there were significant differences among groups（ P d0.01）. The apoptosis rate of At group were 0.87 ± 0.35 % （At1）, 4. 53±0.32%（At2）, 7.45±1.97%（At3） and 10.92±1.27%（At4）, respectively, and there were significant differences among groups（P〈0.01）. TheapoptosisrateofBgroupwere4.46±0.53%（B1）, 1.38±0.12%（B2）, 2.89±0.27%（B3） and 3.65±0.08% （B4）, respectively, and there was significant difference between each intervention group and control group（ P 〈0.01）. The apoptosis rate of C group were 4.60±0.64% （C1）, 2.61±0. 18% （C2）, 2.21±0.22% （C3） and 1.28±0.34% （C4）, respectively, and there was significant difference between each intervention group and control group （P 〈0. 01）. Conclusion] TNF-a can induce the apoptosis of endothelial cells in dose-dependent and time-dependent manner. Simvastatin and probucol both can inhibit TNF-a-induced apoptosis of endothelial cells without concentration-dependent manner.