钙通道阻滞剂对缺血再灌注兔脑皮质一氧化氮、含水量和细胞内游离钙的影响

背景：近年来研究发现一氧化氮参与了脑缺血损伤的发生，但对于其确切作用至今尚无统一的结论。目的：探讨一氧化氮在缺血再灌注脑损伤中的作用，比较两类钙通道阻滞剂的脑保护作用。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点和材料：实验在首都医科大学附属北京儿童医院ICU实验室完成，实验动物为由首都医科大学动物实验室提供体质量2.0～2.4kg新西兰兔66只。方法：夹闭双侧颈总动脉和颈动脉30min后放开制作兔脑缺血再灌注模型。选取36只新西兰兔分为假手术、再灌注0.5、1．5、3、6、24h共6组，测定脑皮层匀浆一氧化氮及含水量。另选30只新西兰兔分假手术、安慰剂(0.9％生理盐水)、尼莫地平(首剂5μg／kg，20min内静脉注入，维持量0．5μg／kg&;#183;min)、氯胺酮(首剂20mg／kg，30min内静脉注入，维持量10mg／(kg&;#183;h)、尼莫地平+氯胺酮治疗共5组，于再灌注30min开始持续静脉用药至再灌注6h取脑皮层，使用Griess法测定一氧化氮，以Fluo-3 Ca^2+荧光试剂标记新鲜活脑片细胞内游离钙(Ca^2+]i)，激光共聚焦显微镜测定Ca^2+]i相对荧光强度。主要观测指标：生理参数变化，再灌注不同时间兔脑皮层一氧化氮及含水量变化，用药组兔脑皮层一氧化氮、含水量、Ca^2+]i。结果：再灌注后脑皮层一氧化氮、含水量逐渐升高，于再灌注6h达较高水平分别为(14．72&;#177;1．66)μmol／g，(86.68&;#177;1．90)％，P&;lt;0．05]，一氧化氮与含水量间具有相关性(r=0．577，P&;lt;0．01)。尼莫地平、尼莫地平+氯胺酮组一氧化氮明显降低分别为(5．08&;#177;0.88)、(5．14&;#177;1．12)μmol／g，P&;lt;0．01]，尼莫地平、氯胺酮以及尼莫地平+氯胺酮组含水量明显降低分别为(76．31&;#177;4．00)、(81．04&;#177;1．86)、(78．16&;#177;1．41)％，P&;lt;0．01]，尼莫地平组较氯胺酮组降低更明显(P&;lt;0．01)。安慰剂组Ca^2+]i较假手术组明显升高分别为(26．84&;#177;1．39)、(4．99&;#177;0.39)，P&;lt;0．01]，尼莫地平、氯胺酮及尼莫地平+氯胺酮治疗后Ca^2+]i明显降低分别为(7．74&;#177;1．11)、(13．30&;#177;1．99)、(8．97&;#177;2．01)，P&;lt;0．01]。尼莫地平组较氯胺酮组降低更明显(P&;lt;0．01)。结论：一氧化氮与脑缺血再灌注损伤的发生有密切关系。尼莫地平、氯胺酮均有一定脑保护作用，但氯胺酮作用弱于尼莫地平。