反义T-STAR基因对A549细胞的调节作用 |
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引用本文: | 郭莲,彭勇,陈兵.反义T-STAR基因对A549细胞的调节作用[J].中国临床康复,2006,10(20):107-110,i0004. |
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作者姓名: | 郭莲 彭勇 陈兵 |
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作者单位: | 解放军第三军医大学西南医院内分泌科,重庆市400038 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30271442,39980010) |
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摘 要: | 目的:观察反义T-STAR基因对肺腺癌细胞A549的T-STAR蛋白表达的调节作用。
方法:实验于2002-09/2004-03在西南医院中心实验室完成。①用双酶切定向克隆法.构建T-STAR反义核酸真核表达载体pneo-STAR。②A549细胞分4组用脂质体介导转染法分别转染:A549-STAR细胞组转入正义T-STAR基因真核表达载体pEGFP-C1/T-STAR,A549-asSTAR细胞组转入反义T-STAR基因真核表达载体pneo-STAR,A549-neo细胞组转入空载体质粒pcl-neo,A549细胞组为相同处理下不加任何载体的A549细胞。③用反转录-聚合酶链反应和western blot联合检测以上各组细胞的T-STAR表达情况。
结果:①A549-STAR细胞组的T-STAR蛋白和RNA表达量显著高于A549细胞组(19434&;#177;219)和(1.280&;#177;0.018),(6922&;#177;113)和(0.323&;#177;0.015),P〈0.05]。②A549-asSTAR细胞组的T-STAR蛋白和RNA表达量(1122&;#177;97),(0.133&;#177;0.005)]显著低于A549细胞组(P〈0.05)。③A549-neo细胞组的T-STAR蛋白和RNA表达量(6295&;#177;143),(0.625&;#177;0.085)]与A549细胞组差异无显著性意义(P〉0.05)。
结论:导入正义T-STAR基因后的A549细胞中,T-STAR蛋白及RNA表达增加,导入反义T-STAR基因后的A5.9细胞中,T-STAR蛋白及RNA表达减少,说明反义核酸真核表达载体pneo-STAR可以特异性降低A549细胞中T-STAR基因的表达.为进一步研究T-STAR基因的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 基因 端粒 末端转移酶 RNA 反义 转染 |
文章编号: | 1671-5926(2006)20-0107-04 |
收稿时间: | 02 27 2005 12:00AM |
修稿时间: | 2005-02-272006-03-17 |
Regulatory effect of antisense T-STAR gene on A549 cells |
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