参与调控人牙髓干细胞黏附能力的相关整合素分析

目的探究体外模拟微重力环境下参与调控人牙髓干细胞黏附能力的相关整合素。方法以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架为载体,将原代培养的人牙髓干细胞接种于PLGA支架上,分为模拟重力组(所受重力保持在10-2g)与常规培养对照组,每组各12个支架;用阳离子脂质体介导的细胞转染构建整合素α5寡核苷酸序列转染组,同时设置只加入siRNA-mate的空转染组、空白对照组。Western blot检测细胞支架复合物中整合素α5、αV、β1以及粘附斑激酶、磷酸化粘附斑激酶的表达水平;使用整合素α5寡核苷酸序列转染人牙髓干细胞,抑制整合素α5表达。荧光染色检测转染后人牙髓干细胞的粘附能力; Western blot检测整合素β1及下游信号分子(粘附斑激酶、磷酸化粘附斑激酶)的表达水平。结果模拟重力组整合素α5、粘附斑激酶、磷酸化粘附斑激酶相对表达量明显高于对照组(P 0. 05);整合素αV、整合素β1相对表达量在模拟重力组与对照组之间差异无统计学意义(P 0. 05)。整合素α5寡核苷酸序列转染的人牙髓干细胞中整合素α5蛋白表达水平明显低于空白对照组和空转染组(P 0. 01)。整合素α5寡核苷酸序列转染组人牙髓干细胞在PLGA支架上的粘附细胞数明显低于空白对照组、空转染组(P 0. 01);整合素α5寡核苷酸序列转染组粘附斑激酶、磷酸化粘附斑激酶的相对表达量明显低于空白对照组(P 0. 05);整合素β1在整合素α5寡核苷酸序列转染组与对照组之间差异无统计学意义(P0. 05)。结论体外模拟微重力环境下,人牙髓干细胞在PLGA支架上的粘附能力增强与整合素α5及其下游信号分子粘附斑激酶、磷酸化粘附斑激酶的表达水平上调有关。