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基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测
引用本文:范子豪,田原,徐玲,曹亚玲,陈思思,潘桢桢,张向颖,段钟平,任锋.基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测[J].临床检验杂志,2022(2):87-91.
作者姓名:范子豪  田原  徐玲  曹亚玲  陈思思  潘桢桢  张向颖  段钟平  任锋
作者单位:首都医科大学附属北京佑安医院
基金项目:国家自然科学(81770611,82002243);北京自然科学基金和北京市教委联合资助重点项目(KZ202010025035);首都卫生发展科研专项重点攻关项目(首发2020-1-1151,首发2021-1G-2181);北京市科技计划“首都临床诊疗技术研究及示范应用”专项课题(Z191100006619096、Z191100006619097);北京市优秀人才培养项目(2018000021469G289);北京市医院管理中心“青苗”计划专项经费资助(QML20201702)
摘    要:目的 建立基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测HBV DNA的方法,并实现对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA的精准检测。方法 构建pUC57-HBV质粒作为阳性对照质粒,设计合成HBV DNA ddPCR引物及探针,以梯度稀释的阳性对照质粒为模板进行ddPCR检测,完成标准曲线构建和检出限分析,并进行检测的重复性和特异性分析。收集首都医科大学附属北京佑安医院19例乙型肝炎低病毒血症患者的血浆样本(HBV DNA<10 IU/mL),提取HBV DNA后进行ddPCR检测。结果 建立的基于ddPCR技术检测HBV DNA的方法检测下限低至1 copy/μL(阳性质粒稀释法);对3种不同拷贝的阳性对照质粒(1×102、1×101、1×100 copies/μL)重复检测的变异系数分别为18.8%、9.9%、9.7%,且具有100%特异性;应用该方法在低于临床检测下限的乙型肝炎低病毒血症患者中,以1 copy/μL为临界值,HBV DNA的阳性检出率为68.42%。结论 ...

关 键 词:微滴式数字PCR  乙型肝炎病毒  低病毒血症  HBV  DNA  精准检测
收稿时间:2021/7/21 0:00:00

Accurate detection of plasma HBV DNA in patients with hepatitis B low-load viremia based on droplet digital PCR.
Abstract:
Keywords:Key words: droplet digital PCR  hepatitis B virus  low-load viremia  HBV DNA  accurate detection
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