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用实时荧光定量PCR选择急性呼吸窘迫综合征患者血清microRNA内参照基因
引用本文:李建春,毛璞,李希,潘莹,吴苏龙,庞晓清,许智恒,黄勇波,刘晓青,黎毅敏.用实时荧光定量PCR选择急性呼吸窘迫综合征患者血清microRNA内参照基因[J].临床检验杂志,2015(3):166-169.
作者姓名:李建春  毛璞  李希  潘莹  吴苏龙  庞晓清  许智恒  黄勇波  刘晓青  黎毅敏
作者单位:广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院医院感染管理科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120;广州医科大学附属第一医院 重症医学科,广州 510120
基金项目:国家自然科学基金(81000005)。
摘    要:目的探讨用实时荧光定量PCR检测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清微小RNA(microRNA,miRNA)的表达并选择最优内参照基因。方法用实时荧光定量PCR检测40例ARDS患者及20例体检健康者血清中5个miRNA候选内参照基因miR-16-5p、miR-93-5p、miR-101-3p、miR-191-5p和U6,并用ge Norm法、Norm Finder法、bestkeeper法和相对△Ct法4种算法分析内参照基因稳定性,通过对4种算法稳定值进行排序并计算几何均数的方法分析综合稳定值。结果比较5个候选内参照基因在ARDS患者和体检健康者的表达水平,差异均无统计学意义(P均0.05)。4种算法综合分析显示,miR-16-5p以最小的稳定值1.32成为综合稳定性最高的内参照基因,其次是miR-101-3p、U6、miR-93-5p和miR-191-5p。结论实时荧光定量PCR法确定ARDS患者血清miRNA最优的内参照基因为miR-16-5p。

关 键 词:急性呼吸窘迫综合征  实时荧光定量PCR  血清微小RNA  内参照基因
收稿时间:2014/12/24 0:00:00

Selection of internal reference genes serum microRNA in acute respiratory distress syndrome patients by real-time quantitative RT-PCR detection
Abstract:
Keywords:acute respiratory distress syndrome  real-time quantitative PCR  serum microRNA  internal reference gene
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