可溶性Ⅱ型胶原蛋白提取纯化条件的研究 |
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引用本文: | 姜旭淦,陈盛霞,王卉放,吴亮,许化溪.可溶性Ⅱ型胶原蛋白提取纯化条件的研究[J].临床检验杂志,2006,24(6):418-421. |
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作者姓名: | 姜旭淦 陈盛霞 王卉放 吴亮 许化溪 |
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作者单位: | 江苏大学医学技术学院,江苏,镇江,212001 |
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摘 要: | 目的 优化实验条件,建立提取纯化可溶性Ⅱ型胶原蛋白(soluble collagen typeⅡ,SCⅡ)的可靠方法.方法 选择鸡胸箭突软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖,对胃蛋白酶的消化方式、氯化钠盐析浓度、DEAE阴离子树脂种类进行研究.采用SDS-PAGE、吸收光谱分析、氨基酸成分分析对SCⅡ进行鉴定.结果 4 mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖,分二步加入胃蛋白酶的消化结果满意,氯化钠盐析浓度为2.4 mol/L时最佳.SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的SCⅡ与Sigma公司的产品一致,SCⅡ最大吸收峰为230 nm,在检出的15种氨基酸中甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高.结论 改进后的方法具有材料广泛、实验条件简便、结果可靠等优点,适用于科研、临床各种规模SCⅡ的提取.所得产品纯度高、符合Ⅱ型胶原的特征.
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关 键 词: | Ⅱ型胶原蛋白 类风湿性关节炎 软骨 蛋白多糖 |
文章编号: | 1001-764X(2006)06-0418-04 |
收稿时间: | 2006-03-07 |
修稿时间: | 2006-06-19 |
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